大鼠巢蛋白(Nestin)ELISA試劑盒
ELISA試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本含量。應用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入，再與HRP標記的抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度，通過標準曲線計算樣品濃度。
大鼠巢蛋白(Nestin)ELISA試劑盒工具/原料
聚苯乙烯塑料板（也就是酶標板）40孔或96孔、ELISA檢測儀、50μl及100μl加樣器、塑料滴頭、小毛巾、洗滌瓶。
2. 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
操作過程
1
標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
大鼠巢蛋白(Nestin)ELISA試劑盒2
加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在上海恒遠生物白介素ELISA試劑盒酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4
配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
大鼠巢蛋白(Nestin)ELISA試劑盒7
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
8
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
9
終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
10
測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
END
大鼠巢蛋白(Nestin)ELISA試劑盒計算方法
1
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。
END
大鼠巢蛋白(Nestin)ELISA試劑盒注意事項
試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
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