溴甲酚紫蛋白胨培養液
英文名稱:Bromcresol Purple Peptone Broth?
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3.11 氨基酸脫羧酶實驗培養基
成分:蛋白胨:5g,酵母浸膏:3g,葡萄糖:1g,蒸餾水:1000ml,1.6%溴甲酚紫乙醇溶液:1ml,L-氨基酸或DL-氨基酸:0.5g或1g/100ml,pH6.8。
制法:除氨基酸以外的所有成分加熱溶解后,分裝每瓶100ml,分別加入各種氨基酸:賴氨酸、*和*。L-氨基酸按0.5%加入,DL-氨基酸按1%加入。再調pH6.8,對照培養基不加氨基酸。分裝于滅菌的小試管內,每管0.5ml,上面滴加一層液體石蠟。115℃高壓滅菌10min。
實驗方法:從瓊脂斜面上挑取培養物接種,于36℃±1℃下培養18~24h,觀察結果,氨基酸脫羧酶陽性者由于產堿,培養基應呈紫色。陰性者因為堿性物質產生,但因葡萄糖產酸而是培養基變成黃色,對照管應為黃色。
3.12 蛋白胨水(靛基質試驗用)
成分:蛋白胨或胰蛋白胨:20g,氯化鈉:5g,蒸餾水:1000ml,pH7.4
制法:將上述成飛混合均勻,分裝小管,121℃滅菌15min。
靛基質試劑:
柯凡克試劑:將5g對二氨基甲醛溶于75ml戊醇中,然后慢慢加入濃鹽酸25ml。
歐-波試劑:將1g對二氨基苯甲醛溶于90ml95%的乙醇內,然后慢慢加入濃鹽酸20ml。
實驗方法:挑取少量接種物接種,在36℃±1℃下培養1~2天,必要時可培養4~5天,加入柯凡克試劑約0.5ml,輕搖試管,陽性者試劑層呈深紅色,或加入歐-波試劑,沿管壁流下,覆蓋于培養液表面,陽性者接觸面上呈玫瑰紅色。
注:蛋白胨應含有豐富的*,每批蛋白胨買來后應用已知菌種實驗。
3.13 糖發酵管
成分:牛肉膏:5g,蛋白胨:10g,氯化鈉:3g,十二水*:2g,0.2%溴*藍溶液:12ml,蒸餾水:1000ml,pH7.4。
葡萄糖發酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分裝于有一個倒置小管的小試管內,121℃滅菌15min。
其他各種糖發酵管可按上述成分配好后,分裝每瓶100ml,121℃滅菌15min,另將各種糖類配好10%溶液,一同滅菌,將5ml糖溶液加入到100ml液體培養基中,以無菌操作分裝小試管。
注:蔗糖不純,加熱后會自行水解者,應采用過濾法除菌。
實驗方法:從瓊脂斜面上挑取小量培養物接種,于36℃±1℃,一般觀察2~3天,遲緩反應需觀察14~30天。
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