改良TGC流體培養基(無指示劑)  

英文名稱:TGC Medium without Indicator Fluid?

改良TGC流體培養基(無指示劑)

選擇適宜的營養物質
總體而言，所有微生物生長繁殖均需要培養基含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子、水及能源，但由于微生物營養類型復雜，不同微生物對營養物質的需求是不一樣的，
因此首先要根據不同微生物的營養需求配制針對性強的培養基。自養型微生物能從簡單的無機物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質、核酸、維生素等復雜的有機物，
因此培養自養型微生物的培養基*可以(或應該)由簡單的無機物組成。例如，培養化能自養型的氧化硫硫桿菌(Thiobacillus thiooxdans)的培養基組成見表3.9。
在該培養基配制過程中并末專門加入其他碳源物質，而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。

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培養基配方
1 斜面菌種保存培養基
1.1PDA培養基（*）
稱取200g馬鈴薯，洗凈去皮切碎，加水1000ml煮沸0.5h，紗布過濾，濾液補足1000ml，再加15g葡萄糖和15-20g瓊脂，充分溶解后趁熱紗布過濾，分裝試管，每試管約5-10ml（視試管大小而定），121℃滅菌20分鐘左右后取出試管擺斜面，冷卻后貯存備用。
1.2麥芽汁瓊脂培養基
麥芽汁的制備：干麥芽首*行粉碎（不能太粗，也不必太細。太粗影響糖化效率，過細影響過濾速度），按麥芽重量的3~4倍加水，攪拌均勻后，37℃左右浸泡1小時，然后緩緩加溫至55~63℃（在升溫過程中應不斷攪拌使溫度均勻），保溫4~6小時（用0.02摩爾/升碘液測定為黃色至無色時），糖化結束。在糖化過程中，應每小時攪拌一次。取過濾后的清液，加1.8%瓊脂，分裝試管，每試管約5-10ml（視試管大小而定），121℃滅菌20分鐘左右后取出試管擺斜面，冷卻后貯存備用。
2 基菌落總數檢測
2.1平板計數瓊脂培養基
將?胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、瓊脂15.0g加入蒸餾水1000ml中，煮沸溶解后，調pH，然后在121℃下滅菌15min，取出，稍微冷卻后，帶熱倒入培養皿中。
3志賀氏菌檢測
3.1 GN增菌液
成分：胰蛋白胨：20g，葡萄糖：1g，*：2g，檸檬酸鈉：5g，去氧膽酸鈉0.5g，磷酸二氫鉀4g，*1.5g，氯化鈉5g，蒸餾水1000ml。pH7.0
制法：將上述物品加入蒸餾水中，加熱溶解煮沸，調pH為7.0，分裝，在115℃高壓滅菌15min。
3.2 HE瓊脂
成分：胨：12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖12g，水楊素2g，*20g，氯化鈉5g，瓊脂18~20g，蒸餾水1000ml0，0.4%溴*藍溶液16ml，Andrade指示劑20ml.，甲液20ml，乙液20ml。pH7.5
制法：將上述前七種成分加入400ml蒸餾水中作為基礎液，將瓊脂加入到600ml蒸餾水中加熱溶解，加入甲液乙液到基礎液中，調pH，再加入指示劑，并與瓊脂液合并，待冷卻至50~55℃，傾注澆平板。
注1：此培養基不能高溫滅菌。
注2：甲液的配置：
*：34g，檸檬酸鐵鈉：4g，蒸餾水：100ml。
注3：乙液的配置：
去氧膽酸鈉：10g，蒸餾水：100ml。
注4：Andrade指示劑的配置：
酸性復紅：0.5g，1mol/l的氫氧化鈉溶液：16ml，蒸餾水：100ml。
將酸性復紅溶解于蒸餾水中，加入氫氧化鈉溶液，數小時后如復紅褪色不全，再加氫氧化鈉溶液1~2ml。盒 

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