人皮膚黑色素瘤細胞,A375

研究范圍】僅供科研使用
【細胞特征】每兩到三天進行換液。細胞應當在融合前傳代
【細胞培養表述】
一、態觀察。細胞膜是每天必須觀察的，看是否清晰，細胞的死亡往往是從細胞膜的破裂開始的，早期的表現就是細胞膜某一點出現欠完整或者毛發影。
二、細胞往往會有“抱團”現象，抱團生長或死亡，個人認為應該勤換液或傳代，盡量避免細胞抱團。
三、長迅速，強烈建議用較大的培養瓶養，用小瓶養的話，換液不及時，很容易死亡。細胞的生長速度一般為2天左右就需要傳代，并且一般為一傳三，或一傳四。
四、培養液：1640培養液，1L一般加*2g，并加雙抗，胎牛血清濃度*為12%，zui低不低于10%，細胞對胎牛血清高度依賴。培養液PH應調為7.20-7.40之間。
五、防污染。細胞生長迅速，較少發生污染，但常規措施應該做好。比如無菌操作，酒精消毒等，培養瓶口建議過火，包括瓶蓋，應過火4秒左右。
六、凍存。-20一小時，-80一夜，液氮*保存。強烈建議液氮*保存，盡量不要在-80*保存，死亡率很高。
七、復蘇。調節水浴箱溫度為42℃，并提前在試管內放置10倍培養液，使培養液溫度與室溫*。1分鐘內融化細胞（禁止搖晃凍存管），移取至試管內，動作要輕，從試管管底開始慢慢上提移液管，使細胞在培養液內分布均勻，離心，洗2次。

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