人類白細胞抗原A(HLA-A)ELISA試劑盒
英文名稱: Human leukocyte antigen A,HLA-A ELISA KIT
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人類白細胞抗原A(HLA-A)ELISA試劑盒
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人類白細胞抗原A(HLA-A)ELISA試劑盒試劑盒試驗原理:
Elisa測定試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系。
試劑盒操作步驟
1)自備材料蒸餾水,加樣器,振蕩器及磁力攪拌器等。
2)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
人類白細胞抗原A(HLA-A)ELISA試劑盒