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技術文章

實驗室常見實驗技術介紹

點擊次數:958 發布時間:2018-7-16

細胞培養、分子克隆、免疫印跡法 (Western blotting,WB是生命科學實驗室及基礎醫學實驗室中常見的實驗技術。廣泛應用于高校、科研院所實驗室,基礎醫學實驗室,生物產業相關企業中。

一、細胞培養

也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。

不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養都是一個*的過程,細胞培養本身就是細胞的大規模克隆。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術*的環節,而且細胞培養本身就是細胞的克隆。通過細胞培養得到大量的細胞或其代謝產物。因為生物產品都是從細胞得來,所以可以說細胞培養技術是生物技術中核心、基礎的技術。

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二、分子克隆

在分子水平上提供一種純化和擴增特定DNA片段的方法。

常含有目的基因,用體外重組方法將它們插入克隆載體,形成重組克隆載體,通過轉化與轉導的方式,引入適合的寄主體內得到復制與擴增,然后再從篩選的寄主細胞內分離提純所需的克隆載體,可以得到插入DNA的許多拷貝,從而獲得目的基因的擴增。

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三、免疫印跡法 (Western blottingWB)

一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術。

免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優點,是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種常用的方法,如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。 免疫印跡法(immunoblotting test,IBT)亦稱酶聯免疫電轉移印斑法(enzyme linked immunoelectrotransfer blot,EITB),因與Southern早先建立的檢測核酸的印跡方法 Southern blot 相類似,亦被稱為Western-blot.

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