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蘇木素-伊紅染色試劑盒HE Staining Kit
HE Staining Kit蘇木素-伊紅染色試劑盒
產品簡介
組織學和病理學標本的染色方法很多,但zui基本的染色方法是蘇木精-伊紅染色。該方法可將細胞核染成藍紫色,細胞質染成粉紅色,使細胞結構對比分明。
蘇木精(Hematoxylin)是從熱帶植物蘇木中提取的一種色素,蘇木精不能直接染色,必須暴露在空氣中變成氧化蘇木精(又叫蘇木素)-“成熟”后才能使用。蘇木精的“成熟”需時較長,配制后時間愈久,染色力愈強。蘇木素中帶正電荷的色精可吸附在細胞核中帶負電荷的核酸成份上而將細胞核染成藍紫色。伊紅是帶負電荷的酸性染料,使細胞漿呈現粉紅色或紅色。
采用蘇木素-伊紅染色試劑盒(Hematoxylin-Eosin Staining Kit)進行免疫染色后的復染,操作步驟簡便,操作時間短。可以廣泛用于組織切片或培養細胞的染色,或與免疫組織化學、免疫細胞化學、免疫熒光、原位雜交等配合使用。使用蘇木素-伊紅染色試劑盒染色后,也可以進行免疫染色或其它染料的復染。染色后的細胞核呈現藍色,細胞漿呈現粉紅色或紅色。
染色液可以重復使用,直至認為效果不佳時再換用新的染色液。
保存條件
室溫保存,至少一年有效。
蘇木素-伊紅染色試劑盒HE Staining Kit使用說明
1. 樣品處理
a) 對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘,換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘,無水乙醇5分鐘,90%乙醇2分鐘,70%乙醇2分鐘,蒸餾水2分鐘。
b) 對于冰凍切片:經固定的切片置蒸餾水2分鐘。
c) 對于培養細胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上,蒸餾水洗滌2分鐘,換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2分鐘。
2. 蘇木素-伊紅染色
a) 對于上述處理好的樣品,用蘇木素染色5-10分鐘(可以根據染色結果和要求調整時間),回收染色液后,用自來水沖洗去除殘留的染色液,
b) 藍化和分色:用自來水沖洗,待切片變成藍色后,再用含0.5~1%鹽酸的70%酒精溶液進行分色,脫去多余的染料(因為蘇木精染色后,細胞核著色較深,細胞質及結締組織纖維等亦稍著色,影響下步染色及觀察)。然后再用自來水沖洗,使之藍化,需5~10分鐘。
c) 伊紅染色:切片用蒸餾水浸洗后,放入1%伊紅水溶液,浸染5~10分鐘。
d) 脫水:將切片用蒸餾水洗去附在載玻片上的染液后,經70%、80%、90%酒精分色及脫水,再經95%酒精和2次*脫水,每級一般為2分鐘。
e) 透明:切片入二甲苯2次,每次2分鐘。
f) 封固:從二甲苯中取出切片,在切片的組織上滴加適量樹膠,上面再加一蓋玻片,
使樹膠布滿于蓋玻片與載玻片之間的間隙,封固即告完成。將封好的切片標本放入烤箱,待蓋玻片粘著牢固后,即獲得可供觀察和保存的H·E染色標本。
3. 進行其它染色
如果進行免疫熒光染色,伊紅染色液染色后,70%乙醇洗滌2次,每次2分鐘,再用PBS或生理鹽水、TBS、TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘,然后就可以進行免疫熒光染色或其它的染色。
注意事項
1.需自備4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇、鹽酸酒精。如果需要脫水、透明和封片處理,還需自備二甲苯、中性樹膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片,需自備90%乙醇、無水乙醇以及二甲苯。
2.染色液可以重復使用多次,認為效果不佳時再更換新的染色液。樣品數量很多時,可使用染色架和染色缸,以便于操作。
3.*次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預實驗。
4.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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