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兔基質金屬蛋白酶-3(MMP-3)ELISA試劑盒

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所  在  地上海市

更新時間:2017-11-24 06:07:14瀏覽次數:199次

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兔基質金屬蛋白酶-3(MMP-3)ELISA試劑盒齊一生物科技(上海)有限公司*的供應商,提供報價,咨詢,技術服務,咨詢選購。齊一生物www.qiyibio.com 進口elisa試劑盒、elisa試劑盒,分子學試劑盒,免疫組化試劑盒,rna提取試劑盒,質粒提取試劑盒 全套供應

試劑盒名稱兔基質金屬蛋白酶-3(MMP-3)ELISA試劑盒
規 格:48T/96T
價格:電議,或咨詢在線客服,或者以郵件形式發到我司741653262,齊一生物公司提供
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定血清,血漿及相關液體樣本中含量。
兔基質金屬蛋白酶-3(MMP-3)ELISA試劑盒實驗原理:
   本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中水平。用純化的本產品抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入本產品抗原,再與HRP標記的本產品抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的本產品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中濃度。
試劑盒組成:
試劑盒組成    48孔配置    96孔配置    保存
說明書    1份    1份    
封板膜    2片(48)    2片(96)    
密封袋    1個    1個    
酶標包被板    1×48    1×96    2-8℃保存
標準品:1800ng/L    0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶    2-8℃保存
標準品稀釋液    1.5ml×1瓶    1.5ml×1瓶    2-8℃保存
酶標試劑    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
樣品稀釋液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
顯色劑A液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
顯色劑B液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
終止液    3ml×1瓶    6ml×1瓶    2-8℃保存
濃縮洗滌液    (20ml×20倍)×1瓶    (20ml×30倍)×1瓶    2-8℃保存
標本要求: 
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200 ng/L,800 ng/L ,400 ng/L,200ng/L, 100 ng/L)。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,使用排搶加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,    
在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD      
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋      
倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標      
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      
倍數,即為樣品的實際濃度。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。
2.批內與批見應分別小于9%和11%     
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存;2-8℃。
2.有效期:6個月

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