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人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA 試劑盒(免費(fèi)代測(cè))

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人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA 試劑盒(免費(fèi)代測(cè))
英文名稱(chēng):Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK ELISA Kit
貨號(hào):QY-H10343
規(guī)格: 96T/48T
種屬: 人、大鼠、小鼠、兔子、羊、牛、豬、植物、魚(yú)、馬
反應(yīng)時(shí)間: 1-5h
所需樣本體積: 50-100ul

產(chǎn)品名稱(chēng):人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA 試劑盒
規(guī)    格:96T/48T
品牌:進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
檢測(cè)標(biāo)本:血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清,組織勻漿等
檢測(cè)方法:ELISA酶聯(lián)免疫夾心法
運(yùn)輸保存:2~8°保存6個(gè)月
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
服務(wù):齊一生物所有的elisa試劑盒均免費(fèi)代測(cè),全程Elisa實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo),免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)。
運(yùn)輸:全國(guó)各地快遞免費(fèi)送貨上門(mén)

人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA 試劑盒

我公司主要經(jīng)營(yíng)進(jìn)口原裝Elisa試劑盒,種類(lèi)齊全,價(jià)格實(shí)惠,購(gòu)買(mǎi)我公司產(chǎn)品的新老客戶,可享免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù),可檢測(cè)人源,小鼠,大鼠,豬,狗,猴,兔,羊,雞,牛,鴨子,魚(yú),植物等各種樣本。全程提供。如需其他Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)及報(bào)價(jià),可我公司。

人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA 試劑盒

本試劑盒僅供研究使用
檢測(cè)范圍:歡迎或或索取原版說(shuō)明書(shū)
zui低檢測(cè)限:歡迎或或索取原版說(shuō)明書(shū)

有效期:6個(gè)月
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
說(shuō)明
1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。
2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不*之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1.         酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2.         標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3.         樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.         標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.         辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.         標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.         辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.         底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.         濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.     終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

 人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA 試劑盒
標(biāo)本的采集及保存
1.         血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)了夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.         血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.         細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過(guò)文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過(guò)程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
標(biāo)記抗體的稀釋原則:
臨用前以標(biāo)記抗體稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl標(biāo)記抗體加990μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
操作步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。
1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl標(biāo)記抗體加99μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
2. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)記抗體工作液、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)記抗體工作液或、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。
5. 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

注意事項(xiàng)
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過(guò)程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。
3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請(qǐng)避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。  

 人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA 試劑盒

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大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒    Rat soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRβ ELISA試劑盒 
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大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒    Rat leukemia inhibitory factor,LIF ELISA試劑盒
大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒    Rat L-Selectin ELISA試劑盒 
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒    Rat monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA試劑盒
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒    Rat monocyte chemotactic protein 2,MCP-2 ELISA試劑盒 
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒    Rat monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISA試劑盒 
大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒    Rat Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA試劑盒 
大鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒    Rat Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA試劑盒 
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒    Rat macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA試劑盒
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒    Rat macrophage inflammatory protein 3β,MIP-3β ELISA試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒     Rat matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒    Rat matrix metalloproteinase 10,MMP-10 ELISA試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒    Rat matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒     Rat matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒     Rat matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA試劑盒 
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒    Rat matrix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISA試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒    Rat matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase,MMP-8 ELISA試劑盒

 

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