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大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞RSMC

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更新時(shí)間:2015-11-17 14:57:57瀏覽次數(shù):164次

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大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞RSMC高品質(zhì)elisa試劑盒細(xì)胞培養(yǎng)方法 
1、收到細(xì)胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細(xì)胞,如包裝完好,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況 ,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時(shí),請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時(shí)之需。
5 、24小時(shí)后,細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,見細(xì)胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過稀,有些生長較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細(xì)胞 ,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度    5%CO2 培養(yǎng)
7.  收到細(xì)胞后,請鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機(jī)與無機(jī)成分、激素、生長因子與微量元素)、細(xì)胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
U937(組織細(xì)胞淋巴瘤)     ATCC
PT-67(病毒轉(zhuǎn)染小鼠細(xì)胞)     ATCC
HEL(紅白血病細(xì)胞)     ATCC
293(轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞)     ATCC
C6(腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞)     ATCC
SHZ-88(大鼠乳腺癌細(xì)胞)     ATCC
CBRH-7919(大鼠肝癌細(xì)胞)     ATCC
NCL-H460(非小細(xì)胞肺癌)     ATCC
F9(畸胎瘤細(xì)胞)     ATCC
5637(人膀胱癌細(xì)胞)     ATCC
A549(人肺腺癌細(xì)胞)     ATCC
MCF-7(人乳腺癌細(xì)胞)     ATCC
B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞)     ATCC
HCC1428(人乳腺癌細(xì)胞)     ATCC
A-704(人腎癌細(xì)胞)     ATCC
NCI-H1755 [H1755](人肺癌細(xì)胞)     ATCC
SK-HEP-1(人肝癌細(xì)胞)     ATCC
NCI-H838 [H838](人肺癌細(xì)胞)     ATCC
SK-OV-3 [SKOV-3](人卵巢癌細(xì)胞)     ATCC
HPAC(人胰腺癌細(xì)胞)     ATCC
PC-3(人前列腺癌細(xì)胞)     ATCC
SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞)     ATCC
EB-3 [EB3](人淋巴樣Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)     ATCC
HT-3(人子宮頸癌細(xì)胞)     ATCC
TT(人骨髓樣甲狀腺癌細(xì)胞)     ATCC
ES-2(人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞)     ATCC
LoVo(人結(jié)腸癌細(xì)胞)     ATCC
HT-29(人結(jié)腸癌細(xì)胞)     ATCC
TE 115.T(人軟組織纖維瘤細(xì)胞)     ATCC
Cates-1B(人睪丸淋巴胚胎性癌細(xì)胞)     ATCC
SNU-398(人肝癌細(xì)胞)     ATCC
Hep 3B2.1-7 [Hep 3B; Hep-3B; Hep3B](人肝癌細(xì)胞)     ATCC
SNU-182(人肝癌細(xì)胞)     ATCC
PLC/PRF/5(人肝癌細(xì)胞)     ATCC
WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤)     ATCC
PA-1(人卵巢畸胎瘤細(xì)胞)     ATCC
Hs 578T(人乳腺成纖維細(xì)胞)     ATCC
Hs 578Bst(人乳腺成纖維細(xì)胞)     ATCC
TE 354.T(人皮膚基底細(xì)胞癌)     ATCC
TE 353.Sk(人正常皮膚細(xì)胞)     ATCC
SW480 [SW-480](人結(jié)腸癌細(xì)胞)     ATCC
SW620 [SW-620](人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)     ATCC
NCI-H1299(人肺癌細(xì)胞)     ATCC
PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤)     ATCC
COS-7(非洲青猴腎細(xì)胞)     ATCC
TOV-112D(人上皮性卵巢癌細(xì)胞)     ATCC
MRC-5(人正常胚肺成纖維細(xì)胞)     ATCC
NCI-H1563 [H1563](人胚肺細(xì)胞)     ATCC
NCI-H2170 [H2170](人肺鱗狀細(xì)胞癌)     ATCC
Hs888Lu(人肺成纖維細(xì)胞)     ATCC
SW 1271 [SW-1271; SW1271](人肺腺癌細(xì)胞)     ATCC
Hep G2(人肝癌細(xì)胞)     ATCC
SJCRH30 [RC13; RMS 13; SJRH30](人骨髓橫紋肌肉癌細(xì)胞)     ATCC
C2C12(人肌肉成纖維細(xì)胞瘤)     ATCC
G-7(小鼠骨骼肌肌肉母瘤細(xì)胞)     ATCC
Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞)     ATCC
BLO-11(小鼠骨骼成纖維細(xì)胞)     ATCC
NOR-10(小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞)     ATCC
NCI-H596 [H596](人肺癌細(xì)胞)     ATCC
NCI-H520 [H520](人肺癌細(xì)胞)     ATCC
NCI-H1703 [H1703](人肺癌細(xì)胞)     ATCC
NCI-H226 [H226](人肺癌細(xì)胞)     ATCC
SK-MES-1(人肺癌細(xì)胞)     ATCC
NCI-H1869 [H1869](人肺癌細(xì)胞)     ATCC
SW 900 [SW-900; SW900](人肺癌細(xì)胞)     ATCC
7F2(小鼠雜交瘤細(xì)胞)     ATCC
3T3-L1(小鼠脂肪細(xì)胞)     ATCC
THLE-3(人肝上皮細(xì)胞)     ATCC
高品質(zhì)elisa試劑盒PT67(小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞)     ATCC
hFOB 1.19(人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞)     ATCC
HIT-T15(倉鼠beta胰島細(xì)胞)     ATCC
Beta-TC-6(小鼠胰腺癌beta細(xì)胞)     ATCC
Ca Ski(人小腸頸部表皮樣癌細(xì)胞)     ATCC
GC-2spd(ts)(小鼠精母細(xì)胞)     ATCC
NCL-H548(人胰腺癌細(xì)胞)     ATCC
人鼻咽癌細(xì)胞系SUNE-1亞株13-9B
人鼻咽癌細(xì)胞系HNE2-LMP1/2
人鼻咽癌細(xì)胞系HNE2-LMP1
人鼻咽癌細(xì)胞系SUME-a
人淋巴細(xì)胞與倉鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞FD4
人淋巴細(xì)胞與倉鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞FD6
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H446 
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H345
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS153
人經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H1688
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H460
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H661
人肺鱗癌細(xì)胞NCI-H520
人肺支氣管癌細(xì)胞NCI-H1650
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCI-H157
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCI-H1975
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H838
人肺小細(xì)胞肺癌NCI-H2227
人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)NCI-H292
人肺腺鱗癌細(xì)胞NCI-H596
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H23
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCI-H2087
人肺腺癌細(xì)胞A549
人肺癌細(xì)胞A-427
人肺癌細(xì)胞H125
人肺巨細(xì)胞癌PG
耐DDP肺癌細(xì)胞A549/DDP
人肺扁平上皮癌細(xì)胞QG-56
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞95-D
人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞801-D
人肺腺癌細(xì)胞SPC-A1
人肺腺癌細(xì)胞LTPEP-a-2
人肺腺癌細(xì)胞LTEP-a-2
人肺腺癌細(xì)胞H1299
人肺鱗癌細(xì)胞SK-MES-1
人肺腺癌細(xì)胞(胸膜滲出液)Calu-3
人肺癌細(xì)胞系(未分化)Calu-6
人胚肺二倍體細(xì)胞HLF-02
人肺癌細(xì)胞系Tul-1
人胚肺成纖維細(xì)胞HFL-I
人胚肺細(xì)胞MRC-5
人胚肺細(xì)胞WI-38 
人SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞 WI-38AV13
人肺癌亞歷山大細(xì)胞系PLC/PRF/5

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