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小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞RAW 264.7

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更新時(shí)間:2015-11-16 15:24:10瀏覽次數(shù):153次

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小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞RAW 264.7一、細(xì)胞操作參考書
二、生長(zhǎng)特性:貼壁    懸浮
三、細(xì)胞生長(zhǎng)條件:
培養(yǎng)基                  90%              (GIBCO)
血清              10%  FBS(GIBCO)
溫度                       37℃
空氣條件      5% CO2,,95% AIR
生長(zhǎng)代數(shù)    P4
凍存條件    培養(yǎng)基70%、血清20%、DMSO10%
四、組成:
組份    規(guī)格
細(xì)胞一瓶    T25
細(xì)胞培養(yǎng)與操作說(shuō)明    1份
五、細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)實(shí)驗(yàn)室,技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決
2.貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢:適當(dāng)提高血清濃度(zui高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3.生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

六、細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml  0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在1-2min)
2.鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散
3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存
特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))
1.收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間zui長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí))
2.貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞放置培養(yǎng)箱孵育過(guò)夜到第二天再做消化傳代
如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并實(shí)驗(yàn)室
人IL-7ELISA試劑盒     Mouse BDNF ELISA Kit
人IL-27ELISA試劑盒      Mouse BMP-2 ELISA Kit
人CSF1R/M-CSFRELISA試劑盒     Mouse EGF ELISA Kit
人Kallikrein 3ELISA試劑盒    Mouse EPO ELISA Kit
人 Receptor Activator of NF-κB (RANK)ELISA試劑盒    Mouse FAS ELISA Kit
人過(guò)氧化物酶ELISA試劑盒    Mouse Fibronectin ELISA Kit
人PAI-1ELISA試劑盒    Mouse G-CSF ELISA Kit
人DKK-1ELISA試劑盒    Mouse GM-CSF ELISA Kit
人PECAM-1/CD31ELISA試劑盒    Mouse ICAM-1 ELISA Kit
人BMP-7ELISA試劑盒    Mouse IFN-γ ELISA Kit
人p53 ELISA試劑盒    Mouse IGF-1 ELISA Kit
人CEAELISA試劑盒    Mouse IGF-2 ELISA Kit
人TLR2ELISA試劑盒    Mouse IGFBP-1 ELISA Kit
人TLR3ELISA試劑盒    Mouse IGFBP-3 ELISA Kit
人組織因子/F3ELISA試劑盒    Mouse IL-1α ELISA Kit
    Mouse IL-1α ELISA Kit
    Mouse IL-2 ELISA Kit
小鼠腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒    Mouse IL-3 ELISA Kit
小鼠BMP-2ELISA試劑盒    Mouse IL-4 ELISA Kit
小鼠表皮生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒    Mouse IL-5 ELISA Kit
小鼠促紅細(xì)胞生成素ELISA試劑盒    Mouse IL-6 ELISA Kit
小鼠凋亡相關(guān)因子ELISA試劑盒    Mouse IL-10 ELISA Kit
小鼠胚胎纖維連接蛋白ELISA試劑盒    Mouse IL-12(p70) ELISA Kit
小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒    Mouse IL-17 ELISA Kit
小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞刺激因子ELISA試劑盒    Mouse Laminin ELISA Kit
小鼠細(xì)胞間粘附分子ELISA試劑盒    Mouse Leptin ELISA Kit
小鼠IFN-γELISA試劑盒    Mouse Leptin receptor ELISA Kit
小鼠IGF-1ELISA試劑盒    Mouse M-CSF ELISA Kit
小鼠IGF-2 ELISA試劑盒    Mouse MMP-2 ELISA Kit
小鼠IGFBP-1ELISA試劑盒    Mouse MMP-3 ELISA Kit
小鼠IGFBP-3ELISA試劑盒    Mouse MMP-9 ELISA Kit
小鼠IL-1αELISA試劑盒    Mouse NGF/NGFβ ELISA Kit
小鼠IL-1αELISA試劑盒    Mouse Neurotrophin-3 ELISA Kit
小鼠IL-2ELISA試劑盒    Mouse OPN ELISA Kit
小鼠IL-3ELISA試劑盒    Mouse PDGF-AB ELISA Kit
小鼠IL-4 ELISA試劑盒    Mouse Rantes ELISA Kit
小鼠IL-5ELISA試劑盒    Mouse L-Selectin ELISA Kit
小鼠IL-6ELISA試劑盒    Mouse P-Selectin ELISA Kit
小鼠IL-10ELISA試劑盒    Mouse TGFβ1 ELISA Kit
小鼠IL-12(p70)ELISA試劑盒    Mouse TNFα ELISA Kit
小鼠IL-17ELISA試劑盒    Mouse VCAM-1 ELISA Kit
小鼠層粘連蛋白ELISA試劑盒    Mouse VEGF ELISA Kit
小鼠瘦蛋白ELISA試劑盒    Mouse E-Cadherin ELISA Kit
小鼠瘦蛋白受體ELISA試劑盒    Mouse Gp130/IL6ST ELISA Kit
小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒    Mouse Resistin ELISA Kit
小鼠MMP-2ELISA試劑盒    Mouse BAFF ELISA Kit
小鼠MMP-3ELISA試劑盒    Mouse P-Cadherin ELISA Kit
小鼠MMP-9ELISA試劑盒    Mouse CD40/TNFRSF5 ELISA Kit
小鼠NGF/NGFβELISA試劑盒    Mouse B7-1/CD80 ELISA Kit
 Anti-H1N1 Hemagglutinin 2    甲型流感病毒血凝素抗體
 Anti-H1N1 Hemagglutinin 2    甲型流感病毒血凝素抗體
 Anti-H1N1/H5N1/H3N2 nucleocapsid protein    A型流感病毒核衣殼蛋白抗體
 Anti-H1N1/H5N1/H3N2 nucleocapsid protein    A型流感病毒核衣殼蛋白抗體
 Anti-H1N1/H5N1/H3N2 nucleocapsid protein    A型流感病毒核衣殼蛋白抗體
 Anti-Hyaluronidase2    透明質(zhì)酸酶2/玻璃酸酶2抗體
 Anti-Hyaluronidase-PH20/Haase    透明質(zhì)酸酶/玻璃酸酶抗體
 Anti-Hamartin/TSC1    結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體
 Anti-phospho-TSC1(Ser505)    磷酸化結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體
 Anti-SCHAD/HADHSC    短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶抗體
 Anti-phospho-TSC1(Thr417)    磷酸化結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體
 Anti-SCHAD/HADHSC(mouse, )    短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶抗體(小鼠,大鼠)
 Anti-Hyaluronidase3    透明質(zhì)酸酶2/玻璃酸酶2抗體
 Anti-KCNH1/EAG1    鉀離子通道蛋白EAG1抗體
 Anti-HAG2/Anterior Gradient 2    前梯度同源蛋白2抗體
 Anti-HERG/KCNH2/ERG    特異性鉀離子通道蛋白抗體
 Anti-HAVCR1/TIM1    腎損傷分子1抗體(甲型肝炎病毒細(xì)胞受體1)
 Anti-HA tag    HA tag標(biāo)簽抗體
 Anti-HA tag    HA tag標(biāo)簽抗體
 Anti-HAI-1    肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物抑制劑抗體
 Anti-HBsAg    人乙肝表面抗原抗體(包被)
 Anti-HBA1/Alpha globin    血紅蛋白α1抗體
 Anti-VWCE     VWCE抗體
 Anti-VWCE    VWCE抗體
 Anti-HB EGF/DTSF    肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子抗體
 Anti-URG4    上調(diào)基因4抗體(N端)
 Anti-URG4 (C terminal)    上調(diào)基因4抗體(C端)
 Anti-HBV pre S1/S2 protein    人乙肝病毒pre S1/S2蛋白抗體
 Anti-HBV pre S1/S2 protein    人乙肝病毒pre S1/S2蛋白抗體
 Anti-HBV pre S1/S2 protein    人乙肝病毒pre S1/S2蛋白抗體
 Anti-HCCR1/BRI3BP    宮頸癌原基因1/bri3結(jié)合蛋白抗體
 Anti-HCCR2/LETMD1    宮頸癌原癌基因2抗體
 Anti-Beta-HCG    人β亞基抗體 
 Anti-HCG/LH/FSH/TSH alpha    α亞基抗體
 Anti-Hck    造血細(xì)胞激酶抗體
 Anti-FHL1/JTK9    膀胱腫瘤抗原抗體
 Anti-FHL2    相互作用蛋白FHL2抗體
 Anti-HCN4    環(huán)化核苷酸調(diào)控陽(yáng)離子通道蛋白亞型4
 Anti-HCLS1/LckBP1    造血干細(xì)胞特異性蛋白抗體
 Anti-HCV-Core    丙型肝炎病毒-C區(qū)抗體
 Anti-ACY 3/HCV-HCBP1    丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體
 Anti-HCV-NS1    丙型肝炎病毒-NS1抗體
 Anti-HCV-NS3    丙型肝炎病毒-NS3抗體
 Anti-HCV-NS4a    丙型肝炎病毒-NS4a抗體
 Anti-HDL    高密度脂蛋白抗體
 Anti-CD36L1/SRB1/HDL-R    高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體
 Anti-Heamachrome    血紅素抗體
 Anti-HER2/c-erbB2    HER2受體抗體
 Anti-HER2 receptor    HER2受體抗體
 Anti-HER2 receptor(NT)    HER2受體抗體
 Anti-HER2 receptor(NT)    HER2受體抗體(N端)
 Anti-Phospho-HER2(Tyr1221/1222)    磷酸化HER2受體抗體
 Anti-Phospho-HER2(Tyr1112)    磷酸化HER2受體抗體

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