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人星形膠質瘤細胞U251本公司代理美國ATCC,理德DSMZ,ScienCell德國細胞庫,ECACC,ICLC,DSMZ的細胞株以及菌株等品牌細胞。齊一生物大量庫存ATCC 細胞,癌細胞,正常細胞,*,質量保證,公司秉承“誠信、專業、高效"的經營理念為廣大客戶服務。歡迎各位老師!齊一生物科技(上海)有限公司:。Web:www.qiyibio。。com
人星形膠質瘤細胞U251細胞培養方法
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要打開細胞培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養基吸出,留下 5-10ML培養基繼續培養:超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液,1000轉/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
4,將培養瓶置于37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細胞形態已恢復并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養瓶里的培養基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數量決定分瓶數,一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液,37度 5%CO2 培養
7. 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養基參考
500ml基礎培養基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素)、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養箱中使用
扁桃體上皮細胞生長因子
口腔角質細胞生長因子
結腸上皮細胞生長因子
支氣管上皮細胞生長因子
小氣道上皮細胞生長因子
骨骼肌細胞生長因子
上皮細胞生長因子
上皮細胞生長因子-2
動物上皮細胞生長因子-2
腎系膜細胞生長因子
尿道上皮細胞生長因子
前列腺上皮細胞生長因子
成骨細胞生長因子
軟骨細胞生長因子
滑膜細胞生長因子
髓核細胞生長因子
肝細胞生長因子
星形細胞生長因子
人胚胎干細胞生長因子 50X
無異種多功能干細胞生長因子 50X
心肌細胞生長因子
角膜上皮細胞生長因子
滋養層細胞生長因子
前脂肪細胞分化生長因子
前脂肪細胞生長因子
脂肪細胞生長因子
卵巢上皮細胞生長因子
間充質干細胞成骨分化生長因子
間充質干細胞脂肪分化生長因子
間充質干細胞生長因子
間充質干細胞生長因子
間充質干細胞生長因子-無動物組分
間充質干細胞軟骨分化生長因子
乳腺上皮細胞生長因子
胎牛血清
胎牛血清
胰酶/EDTA消化液
胰酶中和液
胰酶中和液-無血清
非酶細胞裂解液
細胞凍存液
無血清細胞凍存液
人胚胎干細胞凍存液
人胚胎干細胞凍存液
臺盼藍
磷酸鹽緩沖液
平衡鹽溶液
多聚賴氨酸
多聚賴氨酸
0.2%的明膠溶液
胎牛血清
青霉素/鏈霉素溶液
青霉素/鏈霉素溶液
抗真菌溶液
抗菌/抗霉菌溶液
細胞培養超純水
肌細胞分離液
牛腦垂體提取物
牛腦垂體提取物
胰島素鐵硒傳遞蛋白
左旋谷氨酰胺溶液
100X非必需氨基酸
人胚層檢測試劑盒
油紅O染色試劑盒
人胚胎干細胞分離液
牛血漿纖維粘連蛋白
人細胞纖連蛋白
牛血漿玻連蛋白
重組人血清白蛋白
牛血漿纖維粘連蛋白
膠原I-細胞培養表面包被試劑盒
多聚賴氨酸
多聚賴氨酸
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