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所 在 地上海市
更新時間:2015-11-16 14:24:37瀏覽次數(shù):145次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線人皮膚癌細胞系HS-4細胞齊一生物經(jīng)營ELISA試劑盒(免費代測)及抗體,分子學(xué)生物試劑盒,金標法檢測試劑盒,比色法檢測試劑盒,細胞菌株,培養(yǎng)基,細胞因子,生化試劑,耗材等生物試劑產(chǎn)品.誠信經(jīng)營,價格實惠,服務(wù)周到,質(zhì)量保障!提供各種實驗代測服務(wù).歡迎新老客戶!齊一生物科技(上海)有限公司,專業(yè)生產(chǎn)研發(fā)生化科研試劑全國:歡迎選購!
人皮膚癌細胞系HS-4細胞細胞培養(yǎng)方法
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經(jīng)驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度 5%CO2 培養(yǎng)
7. 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素)、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
"Recombinant Cys-Protein G
"
"Recombinant Protein A/G
"
"Recombinant Streptavidin
"
重組鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子 "Recombinant Human Serum Albumin
"
重組鼠腫瘤壞死因子-α
重組鼠成纖維細胞生長因子-堿性
重組鼠IGF-I
重組鼠表皮細胞生長因子 Endothelial Cell Growth Supplement
Smooth Muscle Cell Growth Supplement
Smooth Muscle Cell Growth Supplement
Pericyte Growth Supplement
重組牛堿性成纖維細胞生長因子 Meningeal Cell Growth Supplement
Neural Precursor Cell Growth Supplement
Neuronal Growth Supplement
Neural Precursor Cell Differentiation Supplement
重組蛋白A Oligodendrocyte Precursor Cell Growth Supplement
重組蛋白G Oligodendrocyte Growth Supplement
重組半胱氨酸-蛋白G Oligodendrocyte Precursor Cell Differentiation Supplement
重組蛋白A/G Schwann Cell Growth Supplement
重組鏈霉親和素 Astrocyte Growth Supplement
重組人血清白蛋白 Astrocyte Growth Supplement-Animal
Microglia Growth Supplement
Macrophage Growth Supplement
Keratinocyte Growth Supplement
內(nèi)皮細胞生長因子 BPE-free Keratinocyte Growth Supplement
平滑肌細胞生長因子 Keratinocyte Growth Supplement-animal component free
平滑肌細胞生長因子(不含血清) Melanocyte Growth Supplement
周細胞生長因子 TPA-free Melanocyte Growth Supplement
腦膜細胞生長因子 Fibroblast Growth Supplement
神經(jīng)前體細胞生長因子 Fibroblast Growth Supplement-sf
神經(jīng)元生長因子 Fibroblast Growth Supplement-animal component free
神經(jīng)前體細胞分化生長因子 Fibroblast Growth Supplement-2
少突膠質(zhì)前體細胞生長因子 Tonsil Epithelial Cell Growth Supplement
少突膠質(zhì)細胞生長因子 Oral Keratinocyte Growth Supplement
少突膠質(zhì)前體分化生長因子 Colonic Epithelial Cell Growth Supplement
雪旺細胞生長因子 Bronchial Epithelial Cell Growth Supplement
星形細胞生長因子 Small Airway Epithelial Cell Growth Supplement
星形細胞生長因子-動物 Skeletal Muscle Cell Growth Supplement
小膠質(zhì)細胞生長因子 Epithelial Cell Growth Supplement
巨噬細胞生長因子 Epithelial Cell Growth Supplement-2
角質(zhì)細胞生長因子 Epithelial Cell Growth Supplement-animal
角質(zhì)細胞生長因子(不含 BPE) Mesangial Cell Growth Supplement
角質(zhì)細胞生長因子(不含動物成分) Urothelial Cell Growth Supplement
黑色素細胞生長因子 Prostate Epithelial Cell Growth Supplement
黑色素細胞生長因子(不含TPA) Osteoblast Growth Supplement
成纖維細胞生長因子 Chondrocyte Growth Supplement
成纖維細胞生長因子-sf Synoviocyte Growth Supplement
成纖維細胞生長因子(不含動物成分) Nucleus Pulposus Cell Growth Supplement
成纖維細胞生長因子-2 Hepatocyte Growth Supplement
扁桃體上皮細胞生長因子 Slate Cell Growth Supplement
口腔角質(zhì)細胞生長因子 StemGS? Human Embryonic Stem Cell Growth Supplement 50X
結(jié)腸上皮細胞生長因子 Xenofree Human Pluripotent Stem Cell Growth Supplement 50X
支氣管上皮細胞生長因子 Cardiac Myocyte Growth Supplement
小氣道上皮細胞生長因子 Corneal Epithelial Cell Growth Supplement
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