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KB細胞人口腔上皮癌細胞培養方法
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要打開細胞培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養基吸出,留下 5-10ML培養基繼續培養:超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液,1000轉/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
4,將培養瓶置于37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細胞形態已恢復并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養瓶里的培養基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的*消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數量決定分瓶數,一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液,37度 5%CO2 培養
7. 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養基參考
500ml基礎培養基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素)、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或*/*(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養箱中使用
人垂草扁桃酸(VMA) ELISA試劑盒
人葡萄糖激酶調節蛋白(GKRP)ELISA試劑盒
人血凝素(HA)ELISA試劑盒
人脂肪分化相關蛋白(ADRP)ELISA試劑盒
人鈣調結合蛋白(CALD)ELISA試劑盒
人鈣調磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒
人骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒
人鈣結合蛋白(CR)ELISA試劑盒
人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒
人脂肪酸結合蛋白(FABP)ELISA試劑盒
人腺苷三磷酸結合盒轉運體A1(ABCA1)ELISA試劑盒
人羥*糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒
人葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒
人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒
人花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒
人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒
人骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒
人*(CTX)ELISA試劑盒
人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒
人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA試劑盒
人β羥丁酸(β-OHB)ELISA試劑盒
人高密度脂蛋白*(HDL-C)ELISA試劑盒
人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA試劑盒
人低密度脂蛋白受體相關蛋白6(LRP-6)ELISA試劑盒
人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒
人低密度脂蛋白受體(LDLR)ELISA試劑盒
人高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒
人α*S轉移酶(α-GST)ELISA試劑盒
人同型半*(Hcy)ELISA試劑盒
人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒
人骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒
人*(FA)ELISA試劑盒
人內毒素(ET)ELISA試劑盒
人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒
人*A(CsA)ELISA試劑盒
人神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒
人*酯轉移蛋白(CETP)ELISA試劑盒
人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒
人*(Cyt-C)ELISA試劑盒
人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒
人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒
人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒
人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒
人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒
人骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒
人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒
人吡啶交聯物(PY)ELISA試劑盒
人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒
人γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒
人P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒
人環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒
T淋巴細胞群CD3檢測試劑盒
T淋巴細胞群CD4檢測試劑盒
T淋巴細胞群CD8檢測試劑盒
蛋白酶A(ProteaseA)檢測試劑盒
蛋白酶B(ProteaseB)檢測試劑盒
羧肽酶Y(CarboxypeptidaseY)檢測試劑盒
氨肽酶(AP)檢測試劑盒
ALVP27-Ag 檢測試劑盒
ALVP27-Ab檢測試劑盒
ALVJ-Ab檢測試劑盒
AIV-H5Ab檢測試劑盒
鹽酸克倫特羅檢測試劑盒
萊克多巴胺檢測試劑盒
*檢測試劑盒
β-興奮劑檢測試劑盒
*代謝物檢測試劑盒
呋喃它酮代謝物檢測試劑盒
*代謝物檢測試劑盒
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孔雀石綠檢測試劑盒
*檢測試劑盒
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*胺檢測試劑盒
*類藥物檢測試劑盒
*檢測試劑盒
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沙拉沙星檢測試劑盒
氟甲喹檢測試劑盒
磺胺類藥物(十五合一)檢測試劑盒
磺胺類藥物(七合一)檢測試劑盒
磺胺類藥物(三合一)檢測試劑盒
*檢測試劑盒
*檢測試劑盒
磺胺二甲氧嘧啶檢測試劑盒
磺胺*氧芐胺嘧啶檢測試劑盒
磺胺喹噁啉檢測試劑盒
*檢測試劑盒(SMD)
*檢測試劑盒
四環素檢測試劑盒
*檢測試劑盒
*檢測試劑盒
*檢測試劑盒
安普霉素檢測試劑盒
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泰樂菌素檢測試劑盒
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替美考星檢測試劑盒
馬杜霉素檢測試劑盒
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頭包類藥物(三合一)檢測試劑盒
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氨芐*檢測試劑盒
鄰氯*檢測試劑盒
雙氯*檢測試劑盒
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安定檢測試劑盒
已烯雌酚檢測試劑盒
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玉米赤霉醇檢測試劑盒
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19-去甲睪丸酮檢測試劑盒
群勃龍檢測試劑盒
喹乙醇檢測試劑盒
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