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所 在 地上海市
更新時間:2015-11-07 16:30:05瀏覽次數(shù):198次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線CCC-HPE-2人胚胰腺組織來源細胞此細胞為我公司向ATCC細胞庫引進,細胞來源真實可靠。詳細說明書,請向客服索要,咨詢、定購。齊一生物科技(上海)有限公司:021- 60348496。Web:www.qiyibio。。com
CCC-HPE-2人胚胰腺組織來源細胞細胞培養(yǎng)方法
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經(jīng)驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度 5%CO2 培養(yǎng)
7. 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素)、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
豬鼻甲黏膜成纖維細胞 PT-K75
小鼠胰腺癌細胞 LTPA
大鼠胰腺癌細胞 DSL-6A/C1
小鼠骨髓瘤B淋巴細胞 SP2/MIL-6
大鼠腦間質(zhì)細胞 DI TNC1
小鼠肌原細胞 C2C12
小鼠胚胎成纖維細胞 3T3-L1
大鼠回腸細胞 IEC-18
非洲綠猴腎細胞 VERO C1008 [Vero 76, clone E6, Vero E6]
小鼠骨髓瘤細胞 Sp2/0-Ag14
鴨子胚胎成纖維細胞 Duck embryo
雞胚胎成纖維細胞 UMNSAH/DF-1
小鼠巨噬細胞 RAW 264.7
倉鼠腎成纖維細胞 YXK-21
小鼠表皮細胞 JB6 Cl 30-7b
小鼠胚胎細胞 NIH/3T3
小鼠血管內(nèi)皮瘤細胞 EOMA
小鼠胚胎纖維細胞 STO
大鼠肝上皮樣干細胞 WB-F344
小鼠乳腺癌細胞 4T1
小鼠睪丸細胞 TM4
大鼠垂體瘤細胞 GH3
大鼠雪旺細胞 RSC96
大鼠肝細胞 BRL3A
大鼠肝細胞 BRL
大鼠小腸隱窩上皮細胞 IEC-6
小鼠腎癌細胞 Renca
袋鼠腎細胞 Pt-K2(Pt K2)
非洲綠猴腎細胞 BS-C-1
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 G422
小鼠肝癌細胞 H22
非洲綠猴腎細胞 Vero
豬腎細胞系 PK15
豬腎細胞系 PK13
豬睪丸細胞系 ST
中國倉鼠卵巢細胞 CHO
中國倉鼠卵巢細胞 CHO-K1
小鼠骨髓瘤細胞 SP2/0
小鼠巨噬細胞 Ana-1
小鼠小膠質(zhì)瘤細胞 Bv-2
大鼠心肌細胞 H9C2(2-1)
大鼠腎小球系膜細胞 HBZY-1
大鼠胰島素瘤細胞 INS-1
鼠肝星形細胞 HSC-T6
Chicken Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit
Chicken toxoplasma circulating antigen,TCA ELISA Kit
Chicken Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit
Hen egg Immunoglobulin of Yolk,IgY ELISA Kit
Hen egg phosvitin phosphopeptides,PPP ELISA Kit
Chicken Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
Chicken Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit
Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA KIT
Chicken Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit
Chicken major histocompatibility complex,MHCB ELISA Kit
Chicken Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISA Kit
Chiken Pullorum Diseaes,PD ELISA Kit
Chicken Interleukin 18,IL-18 ELISA KIT
Chicken virus enteritis,DEV ELISA Kit
Chicken Myoglobin,MYOMB ELISA Kit
Chicken Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit
Chicken Interleukin 3,IL-3 ELISA Kit
Chicken Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit
Chicken Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA kit
Chicken C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit
Chicken Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA KIT
Chicken basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit
Chicken Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA Kit
Chicken soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit
Chicken Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit
Chicken Insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISA Kit
Chicken growth hormone,GH ELISA KIT
Chicken Acetoacetic acid,ACAC ELISA Kit
Chicken infectious coryza,ic ELISA Kit
Chicken Hyaluronic acid,HA ELISA Kit
Chicken heparan sulfate,HS ELISA Kit
Chicken prolactin,PRL ELISA Kit
Chicken Avian Leukosis Virus AG,ALV-AG ELISA Kit
Chicken follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
Chicken Luteinizing Hormone,LH ELISA Kit
Chicken Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
Chicken carbonic anhydrase,CA ELISA Kit
Chicken Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit
Chicken Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit
Chicken Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit
Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit
Chicken Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
Chicken nitric oxide,NO ELISA Kit
Chicken Herpes simplexvirus Ⅱ antibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit
Chicken Complement 3 split product,C3SP ELISA Kit
Chicken adrenomedullin,ADM ELISA Kit
Chicken Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA Kit
Chicken Immune RNA,Irna ELISA Kit
Chicken β-lactamase ELISA Kit
Chicken Japanese Encephalitis IgG,JE IgG ELISA Kit
Chicken α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit
Chicken Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit
Chicken tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA Kit
Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit
Chicken nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit
Chicken factor B,BF ELISA Kit
Chicken 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit
Chicken Laminin,LN ELISA Kit
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