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CCC-HPE-2人胚胰腺組織來源細(xì)胞

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更新時間:2015-11-07 16:30:05瀏覽次數(shù):199次

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CCC-HPE-2人胚胰腺組織來源細(xì)胞此細(xì)胞為我公司向ATCC細(xì)胞庫引進(jìn),細(xì)胞來源真實可靠。詳細(xì)說明書,請向客服索要,咨詢、定購。齊一生物科技(上海)有限公司:021- 60348496。Web:www.qiyibio.com

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CCC-HPE-2人胚胰腺組織來源細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)方法 
1、收到細(xì)胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細(xì)胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺盼藍(lán)染色證實細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細(xì)胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過稀,有些生長較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細(xì)胞 ,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無菌操作。換液時,換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度    5%CO2 培養(yǎng)
7.  收到細(xì)胞后,請鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請離心收集細(xì)胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素)、細(xì)胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞 PT-K75
小鼠胰腺癌細(xì)胞 LTPA
大鼠胰腺癌細(xì)胞 DSL-6A/C1 
小鼠骨髓瘤B淋巴細(xì)胞 SP2/MIL-6
大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞 DI TNC1
小鼠肌原細(xì)胞 C2C12
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T3-L1
大鼠回腸細(xì)胞 IEC-18
非洲綠猴腎細(xì)胞 VERO C1008 [Vero 76, clone E6, Vero E6] 
小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Sp2/0-Ag14
鴨子胚胎成纖維細(xì)胞 Duck embryo
雞胚胎成纖維細(xì)胞 UMNSAH/DF-1
小鼠巨噬細(xì)胞 RAW 264.7
倉鼠腎成纖維細(xì)胞 YXK-21
小鼠表皮細(xì)胞 JB6 Cl 30-7b
小鼠胚胎細(xì)胞 NIH/3T3
小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞 EOMA
小鼠胚胎纖維細(xì)胞 STO 
大鼠肝上皮樣干細(xì)胞 WB-F344
小鼠乳腺癌細(xì)胞 4T1
小鼠睪丸細(xì)胞 TM4
大鼠垂體瘤細(xì)胞 GH3
大鼠雪旺細(xì)胞 RSC96
大鼠肝細(xì)胞 BRL3A
大鼠肝細(xì)胞 BRL
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞 IEC-6
小鼠腎癌細(xì)胞 Renca
袋鼠腎細(xì)胞 Pt-K2(Pt K2)
非洲綠猴腎細(xì)胞 BS-C-1
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 G422
小鼠肝癌細(xì)胞 H22 
非洲綠猴腎細(xì)胞 Vero
豬腎細(xì)胞系 PK15
豬腎細(xì)胞系 PK13
豬睪丸細(xì)胞系 ST
中國倉鼠卵巢細(xì)胞 CHO
中國倉鼠卵巢細(xì)胞 CHO-K1
小鼠骨髓瘤細(xì)胞 SP2/0
小鼠巨噬細(xì)胞 Ana-1
小鼠小膠質(zhì)瘤細(xì)胞 Bv-2
大鼠心肌細(xì)胞 H9C2(2-1)
大鼠腎小球系膜細(xì)胞 HBZY-1
大鼠胰島素瘤細(xì)胞 INS-1
鼠肝星形細(xì)胞 HSC-T6
Chicken Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit
Chicken toxoplasma circulating antigen,TCA ELISA Kit
Chicken Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit 
Hen egg Immunoglobulin of Yolk,IgY ELISA Kit
Hen egg phosvitin phosphopeptides,PPP ELISA Kit
Chicken Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
Chicken Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit
Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA KIT 
Chicken Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit
Chicken major histocompatibility complex,MHCB ELISA Kit 
Chicken Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISA Kit 
Chiken Pullorum Diseaes,PD ELISA Kit
Chicken Interleukin 18,IL-18 ELISA KIT
Chicken virus enteritis,DEV ELISA Kit
Chicken Myoglobin,MYOMB ELISA Kit 
Chicken Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit 
Chicken Interleukin 3,IL-3 ELISA Kit 
Chicken Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit 
Chicken Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA kit 
Chicken C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit 
Chicken Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA KIT 
Chicken basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit 
Chicken Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA Kit 
Chicken soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit 
Chicken Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit 
Chicken Insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISA Kit 
Chicken growth hormone,GH ELISA KIT 
Chicken Acetoacetic acid,ACAC ELISA Kit 
Chicken infectious coryza,ic ELISA Kit
Chicken Hyaluronic acid,HA ELISA Kit
Chicken heparan sulfate,HS ELISA Kit 
Chicken prolactin,PRL ELISA Kit
Chicken Avian Leukosis Virus AG,ALV-AG ELISA Kit
Chicken follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit 
Chicken Luteinizing Hormone,LH ELISA Kit
Chicken Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit 
Chicken carbonic anhydrase,CA ELISA Kit
Chicken Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit 
Chicken Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit 
Chicken Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit 
Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit 
Chicken Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 
Chicken nitric oxide,NO ELISA Kit 
Chicken Herpes simplexvirus Ⅱ antibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit 
Chicken Complement 3 split product,C3SP ELISA Kit 
Chicken adrenomedullin,ADM ELISA Kit
Chicken Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA Kit
Chicken Immune RNA,Irna ELISA Kit
Chicken β-lactamase ELISA Kit
Chicken Japanese Encephalitis IgG,JE IgG ELISA Kit 
Chicken α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit 
Chicken Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 
Chicken tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA Kit 
Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit 
Chicken nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit 
Chicken factor B,BF ELISA Kit 
Chicken 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit 
Chicken Laminin,LN ELISA Kit 

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