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CCC-HEL-1人胚胎肝正常細胞一、細胞操作參考書
二、生長特性：貼壁    懸浮
三、細胞生長條件：
培養基                  90%              （GIBCO）
血清              10%  FBS（GIBCO）
溫度                       37℃
空氣條件      5% CO2，,95% AIR
生長代數    P4
凍存條件    培養基70%、血清20%、DMSO10%
四、組成：
組份    規格
細胞一瓶    T25
細胞培養與操作說明    1份
五、細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如果細胞為貼壁細胞，，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天；同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基，培養3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增殖而是繼續脫落死亡，請及時實驗室，技術人員會跟進解決
2.貼壁細胞生長緩慢：適當提高血清濃度（zui高不能超過20%），或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養瓶繼續培養
3.生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養基進行培養
六、細胞常規培養傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）
1．吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml  0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在1-2min）
2．鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml *培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散
3．取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養
4．注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
特別注意：（如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養，建議添加雙抗培養）
1.收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養基，如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基，請在原瓶培養基中額外添加10%的血清（原瓶培養基的繼續使用時間zui長不宜超過72小時）
2.貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞放置培養箱孵育過夜到第二天再做消化傳代
如簽收時出現培養瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗室
Oct-4  胚胎干細胞關鍵蛋白(多肽)
OPN(osteopontin)  骨橋蛋白（抗原）
P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A)  抑癌基因p16（抗原）
p21/WAF1/CIP1   p21 核分裂抑制因子之一（抗原）
p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B)  p27(抗原)
P63 protein  P63 腫瘤抑制基因（抗原）
OPG(Osteoprotegerin)  護骨素(多肽抗原)
OPGL (Osteoprotegerin ligand)  骨保護蛋白配體(抗原)
P311 protein  增生性瘢痕相關蛋白（抗原）
PARP(poly ADP-ribose polymerase)  多腺苷二磷酸多聚酶抗原
Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human   內脂素/內臟脂肪素（人：N端多肽）、內臟脂肪素、 又稱：前B細胞克隆增強因子、內肥素、腹脂素
Visfatin-1 (PBEF1)(NT) hu、 mo、 rat、MK  內脂素/內臟脂肪素（人、大、小鼠、猴同源：N端多肽）、內臟脂肪素、前B細胞克隆增強因子、內肥素、腹脂素
Visfatin-2(CT)hu、mo、rat、MK  內脂素/內臟脂肪素（抗人、大、小鼠、猴：N端多肽）前B細胞克隆增強因子、內肥素、腹脂素
PEDF (pigment epithelium-derived factor)  色素上皮源性因子(多肽抗原）
PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c)  磷脂酸磷酸酶2C（抗原）
PEPT1 (Peptide-transporters 1)  腸道肽轉運蛋白(小肽轉運蛋白)多肽
PTEN/MMAC1  一種腫瘤抑制基因抗原
PIBF（progesterone induced blocking factor）  孕激素誘導阻斷因子(抗原)
PIWIL1(piwi-like 1)  piwi 樣1蛋白(抗原)
PPARγ (peroxisome proliferator-activated receptor-gamma)  過氧化酶活化增生受體γ（抗原）
PP2Ac  蛋白磷酸酶4(抗原)
Runx3  一種新發現的抑癌基因(抗原)
RRAD (Ras-related associated with diabetes )  RRAD(多肽抗原)
SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1)  基質細胞衍生因子-1(抗原)
shank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1)  shank1抗原
slc22A17 (solute carrier famili 22)  溶質轉運蛋白家族22成員17(多肽抗原)
SLC24A5 (solute carrier family 24, member 5)  可溶性載質轉運蛋白SLC24A5（抗原）
solute carrier family 1  溶質攜帶物家族-1(抗原)
SLC6A4 (solute carrier family 6)  鉀依賴鈉鈣交換蛋白6(抗原)
Survivin  細胞凋亡抑制因子的一種（抗原）
BIRC5/Survivin variant  細胞凋亡抑制因子4（抗原）
SSA/RO (ribonucleoprotein complex,RNP)  核糖核蛋白抗原SSA(抗原)
SSB/La(Sjogren syndrome type B antigen)(抗原)  抗干燥癥SSB/La蛋白抗體
Smad2(Mothers against decapentaplegic homolog 2)  Smad 2/3(抗原)
SPAG5/map126 (sperm associated antigen 5）  抗精子相關抗原5(抗原)
SP-A (pulmonary surfactant-associated glycoprotein A)  肺表面活性蛋白A(抗原)
SP-A (pulmonary surfactant-associated glycoprotein A)  肺表面活性蛋白A(抗原)
SYVN1(synovial apoptosis inhibitor 1)  滑膜細胞凋亡抑制物1（抗體）
SYK (Spleen tyrosine kinase)  非受體型酪氨酸激酶(抗原)
Tau protein  微管相關蛋白（抗原）
TGF-βR 1/ALK-5(TGF-beta receptor type I)  轉移生長因子–β受體 1（抗原）
Thy-1/CD90  CD90(抗原)
Thioster-containing protein 1  硫酯包含蛋白-1(抗原)
TIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator )  P53誘導糖酵解和凋亡調節因子蛋白（抗原）
TIMP-4(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-4)  金屬蛋白酶組織抑制因子-4(抗原)
TPO(Thyroid Peroxidase)  甲狀腺過氧化物酶(抗原)
TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)  促甲狀腺素受體（抗原）
TSLP(Thymic stromal lymphopoietin isoform 1)  淋巴細胞生成素-1（抗原）
TTF-2(thyroid transcription factor 2;forkhead box E1)  甲狀腺轉錄因子-2(抗原)
Tyrosinase  酪氨酸酶(多肽抗原)
OAT4L又稱URAT1 (Urate Transporter 1)  尿酸鹽重吸收轉運子1 (抗原)
VAP1(vascular adhesion protein 1)  血管粘附蛋白1（多肽抗原）
VCAM-1(Vascuolar cell adhesion molecule 1)CD106  血管內皮細胞粘附分子(抗原)
Vimentin  波形蛋白（抗原）
VSIG4 (V-set and immunoglobulin domain-containing protein 4)  VSIG4 T淋巴細胞負調節蛋白之一（抗原）
WNK4(Ser/Thr-protein kinase WNK4; protein kinase with no lysine 4; protein kinase, lysine –dficient 4)  一種新的/激酶家族成員的基因WNK4（多肽抗原）
ZNF300 (zinc finger protein ZNF300)- middle  鋅指蛋白300(抗原)
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- N-terminal (1a)  鋅指脂蛋白-1a(抗原)
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1b)  鋅指脂蛋白-1b(抗原）
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1c)  人鋅指脂蛋白-1c(抗原)
IFN-γ(Interferon γ)Ag-mouse、rat  干擾素-γ多肽抗原（大、小鼠）
IFN-γ(Interferon γ)Ag-Human  干擾素-γ多肽抗原（人）
IFN-β (Interferon β)Anti-mouse,rat  干擾素-β抗原
IFN-β (Interferon β)Anti-human  干擾素-β抗原
PSCA (Prostate Stem Cell Antigen)   前列腺干細胞抗原
sIgA  大鼠分泌型IgA(抗原)
化合物與牛血清白蛋白RCA偶聯抗原      化合物與血藍蛋白KLH偶聯抗原
Melamine/KLH  三聚氰胺與血藍蛋白偶聯物
Melamine/RCA  三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯物
Melamine/OVA(ovalbumin)  三聚氰胺與雞卵白蛋白偶聯物