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齊一生物科技(上海)有限公司資料大小
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218次羥自由基測試盒說明書 一、實驗儀器:
試管、微量移液器、旋渦混勻器、37°C 恒溫水浴鍋,可見分光光度計(550nm)
二、適用范圍:
血清(漿)、各種組織勻漿液、中性白細胞、某些藥物、部分植物、培養(yǎng)細胞、培養(yǎng)上清液等。
三、測定意義:
羥自由基(·OH)是一種氧化能力很強的自由基,其性質(zhì)很活潑,氧化各種有機物和無機物
的速率極快,是造成組織脂質(zhì)過氧化、核酸斷裂、蛋白質(zhì)和多糖分解的主要因素,與機體衰老、
腫瘤、輻射孫損傷和細胞吞噬能力有關。
四、操作步驟:
標準空白管 標準管 對照管 測定管
蒸餾水(ml) 0.4 0.2 0.2
0.03%H2O2標準應用液(ml) 0.2
底物應用液(ml) 0.2 0.2
樣本*(ml) 0.2
試劑三應用液(ml) 0.4 0.4 0.4 0.4
混勻,37℃反應1分鐘(準確以秒表計時),從加完試劑三開始到一分鐘結(jié)束,立即加
入顯色劑終止反應,一次只能做一只管子。
顯色劑(ml) 2 2 2 2
混勻,室溫放置 20 分鐘后,1cm 光徑, 550nm,蒸餾水調(diào)零,測各管吸光度值。
五、計算公式:
1、血清計算公式:
1
(/ ) (8 824 / )
ml
Uml mmol L
?
=×× ×
?
抑制羥自由基 樣本測試前 標準品濃度 對照OD值 測定OD值
標準OD值 空白OD值 取樣量 能力 稀釋倍數(shù) .
2、組織計算公式:
(/ ) (8 824 / ) g Umgprot ml mmol L
? ? ?
=×÷ × ? ?
? ? ?
抑制羥自由基 取樣量 標準品濃度 待測樣本蛋白濃度 對照OD值 測定OD值
標準OD值 空白OD值 能力 () . ( prot/L)
3、溶血液計算公式:
( )
1
8 824 / (/ )
OD OD ml
mmol L OD OD Uml
?
=× ×
?
標準品濃度 抑制羥自由基 樣本測試前 對照 值 測定 值
. 標準 值 標準空白 值 取樣量 能力 的稀釋倍數(shù) ×
4、產(chǎn)生羥自由基能力的計算公式:
( )
1
8824 / (/ )
OD OD ml
mmol L OD OD Uml
?
=× ×
?
標準品濃度 樣本測試前 產(chǎn)生羥自由基 測定 值 對照 值
. 標準 值 標準空白 值 取樣量 的稀釋倍數(shù) 能力 ×
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