日韩午夜在线观看,色偷偷伊人,免费一级毛片不卡不收费,日韩午夜在线视频不卡片

齊一生物科技(上海)有限公司
免費(fèi)會(huì)員

當(dāng)前位置:首頁   >>   資料下載   >>   肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-1)試劑盒說明書下載

肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-1)試劑盒說明書下載

時(shí)間:2018-1-11閱讀:850
分享:
  • 提供商

    齊一生物科技(上海)有限公司
  • 資料大小

    23.3KB
  • 資料圖片

  • 下載次數(shù)

    99次
  • 資料類型

    PNG 圖片
  • 瀏覽次數(shù)

    850次
點(diǎn)擊免費(fèi)下載該資料

齊一生物科技(上海)有限公司 第1頁
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-1)試劑盒說明書
For Research Use only
僅供研究用
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-1)試劑盒說明書貨號(hào):QYS-239012
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測
定測定意義:
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶是存在于線粒體內(nèi)膜的一類酰基轉(zhuǎn)移酶。可逆地催化從酰基輔酶 A
將酰基轉(zhuǎn)移至 L-肉毒堿的反應(yīng),在轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸通過線粒體內(nèi)膜的過程中起重要作用。
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-1)試劑盒說明書測定原理:
基于肉堿和脂酰輔酶 A 在丙二酰輔酶 A 存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-I)
的作用,產(chǎn)生脂酰肉堿,并釋放出巰基輔酶 A(COA-SH),與 Ellman 試劑 DN-TB 反應(yīng)
后,產(chǎn)生黃色的 TNB。通過其吸收峰值得變化(412nm),來定量分析 CPT-1 的活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰、無
水乙醇和蒸餾水
試劑組成和配制:
試劑一:液體 50mL×1 瓶,-20℃保存;
試劑二:液體 10mL×1 瓶,-20℃保存;
試劑三:液體 1mL×1 支,-20℃保存;
試劑四:液體 55mL×1 瓶,4℃保存;
試劑五:粉劑×1 瓶,4℃保存;
試劑六:粉劑×1 支,-20℃保存;
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-1)試劑盒說明書樣本的前處理:
組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
① 稱取約 0.1g 組織或收集 500 萬細(xì)胞,加入 1mL 試劑一和 10uL 試劑三,用冰浴勻
漿器或研缽勻漿。
② 將勻漿液于600g,4℃離心5min。
③ 棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。
④ 上清液即胞漿提取物,可用于測定從線粒體泄漏的CPT-1(此步可選做)。
⑤ 在步驟④的沉淀中加入 200uL 試劑二和 2uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率 20
%或 200W,超聲 3秒,間隔 10 秒,重復(fù) 30次),用于線粒體 CPT-1 測定。
測定步驟:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 412nm,蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測定
(1)在試劑五中加入 2mL 無水乙醇,混勻,再加入 44mL 試劑四,混勻,37℃(哺乳動(dòng)物)
或 25℃(其它物種)孵育 5min;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
(2)在試劑六中加入 2mL 蒸餾水,混勻,37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)孵育
5min;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
(3)(3)在 1mL 玻璃比色皿中加入 40μL 樣本、880μL 試劑五和 40μL 試劑六,
混勻,記錄 412nm 處 20 秒時(shí)的初始吸光度 A1 和 2 分 20秒時(shí)的吸光度 A2,計(jì)算 ΔA=A2-
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-1)試劑盒說明書
CPT-1 活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1 nmol TNB 定義為一個(gè)酶活力單位。
CPT-1(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109
]÷(V 樣×Cpr) ÷T=880×ΔA÷Cpr
此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1 nmol TNB 定義為一個(gè)酶活力單位。
CPT-1(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109
]÷(W× V 樣÷V 樣總)÷T=177.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每 1 萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生 1 nmol TNB 定義為一個(gè)酶活力單位。
CPT-1 ( nmol/min/104
cell ) =[ΔA×V 反 總 ÷ ( ε×d ) ×109
]÷ ( 500×V 樣 ÷V 樣 總 )
÷T=0.3556×ΔA V 反總:反應(yīng)體系總體積,9.6×10-4
L;ε:TNB 摩爾消光系數(shù),1.36×104
L /
mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.04 mL;V 樣總:加入提取液體
積,0.202 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;
500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500 萬。

會(huì)員登錄

×

請輸入賬號(hào)

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 新平| 海淀区| 噶尔县| 桦南县| 富锦市| 建昌县| 侯马市| 呼图壁县| 禄丰县| 南宁市| 龙泉市| 新蔡县| 广南县| 个旧市| 嵊泗县| 虎林市| 遂昌县| 济宁市| 剑川县| 三明市| 石城县| 南昌县| 湖口县| 延边| 康乐县| 汶上县| 伊通| 金寨县| 新河县| 龙江县| 宜城市| 阜康市| 旬阳县| 衡东县| 汉寿县| 读书| 武隆县| 延边| 郴州市| 兴山县| 大田县|