細(xì)胞株名稱:小鼠腎小球系膜細(xì)胞
細(xì)胞編號(hào):MN0077
代號(hào):SV40 MES13
【小鼠腎小球系膜細(xì)胞】傳代操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
常見問題及解決方案
1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞*可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。
2)細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
我公司保證細(xì)胞純度在90%以上;同時(shí)也需經(jīng)過微生物檢測,《 》保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細(xì)菌。
購買細(xì)胞時(shí)注意事項(xiàng):
1)收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2)仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3)用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
及相關(guān)優(yōu)勢產(chǎn)品:
MN0077 | SV40 MES13 | |||
MN0078 | TM3 | 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞 | ||
MN0079 | UMNSAH/DF-1 | 雞胚成纖維細(xì)胞 | ||
MN0080 | Y1 | 小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 | ||
MN0081 | NIH-3T3-L1 | DMEM | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(前脂肪) | 貼壁 |
MN0082 | L6 | DMEN | 大鼠成肌細(xì)胞 | 貼壁 |
MN0083 | DC2.4 | 1640 10%FBS | 小鼠樹突狀細(xì)胞 | 貼壁 |
MC0001 | R15 | 1640 1 | 大鼠肝癌 | 上皮樣 |
MC0002 | C6 | 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤 | ||
MC0003 | PC-12 | DMEM 10% | 大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤 | 圓形,貼壁 |
MC0004 | Yac-1 | 1640 10% | 小鼠紅白血病 | 圓形半貼壁 |
MC0005 | J558L | 1640 10% | C57/L小鼠肝癌 | 圓形半貼壁 |
MC0006 | SP2/0* | DMEM 10% | 小鼠骨髓瘤 | 圓形半貼壁 |
MC0007 | P815* | DMEM 10% | 鼠肥大細(xì)胞瘤 | Suspension(some adherent cells) |
MC0008 | B16 | 1640 10% | 小鼠黑色素瘤 | |
MC0009 | P388 | 1640 10% | 小鼠淋巴樣瘤 | |
MC0010 | L1210 | 1640 10% | 小鼠淋巴白血病細(xì)胞 | |
MC0011 | 4T1 | 1640 10% | 小鼠乳腺病 |
由萬疆生物專業(yè)提供,同時(shí)還提供了完善的售后服務(wù) 歡迎廣大客戶前來咨詢訂購!上海萬疆生物銷售直線-189 1843 6805。