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更新時間:2018-05-28 22:43:43瀏覽次數(shù):267次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線人髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒價格測定錯誤結(jié)果的原因分析
ELISA即酶聯(lián)免疫吸附試驗,是一種常用的固相酶免疫測定方法。Engvall 和Perlmann于1971年zui先應(yīng)用該法進行了IgG定量測定,并命名為"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。人髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒價格的基本原理是:
①使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;
②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標抗原(或抗體),而且此酶標抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③測定時將受檢標本(抗體或抗原)和酶標抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進行反應(yīng),再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應(yīng)底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物,根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進行定性或定量分析,以了解被測標本中抗體或抗原含量。
酶聯(lián)免疫(ELISA)使用試劑盒檢測過程中值得關(guān)注的問題
1、儀器質(zhì)控
為使儀器保持*工作狀態(tài),應(yīng)建立維護和校正儀器的標準操作程序(SOP),所要控制的儀器包括移液器(加樣槍)、溫箱、洗板機和酶標儀。
◎移液器:人髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒價格加樣量小(20-200μl),其準確性直接影響實驗結(jié)果,利用稱重法檢查:低、中、高三個刻度分別吸取指示量的水,萬分之一天平稱重后計算吸量是否準確,一般應(yīng)在±5%以內(nèi);
◎恒溫箱: 經(jīng)常檢查恒溫箱溫度計所示的溫度和水中(或溫箱內(nèi))實測溫度是否*,允許有±1℃的誤差;
◎洗板機: 每個廠家設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定,一般不超過2μl;人工扣板時,墊紙不濕;定期檢查管孔是否堵塞;
◎酶標儀:經(jīng)常維護其光學(xué)部分,防止濾光片霉變,定期檢測校正,使其保持良好的工作性能。
2、試劑盒選擇
◎應(yīng)盡量選擇正規(guī)廠家,產(chǎn)品經(jīng)相應(yīng)政府部門審核認可,試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
◎靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
◎特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測定結(jié)果升高,可能導(dǎo)致假陽性,所以交叉反應(yīng)是評價其質(zhì)量的關(guān)鍵指標。
◎精密度:人髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒價格一般指其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍。
◎準確度:通過添加回收實驗進行評價。
◎簡便性:指在不影響試劑的前三項指標的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性實驗中結(jié)果判斷簡單明了,定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單。
◎安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
◎經(jīng)濟性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進步降低成本,而市場價格比較合理。
◎試劑評價:需要有的確證方法和確證的樣品進行檢測。
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