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大鼠促性腺激素釋放激素受體抗體(GNRHR-Ab)檢測試劑盒報價
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒實驗步驟
一、預試驗(一)抗體包被的酶標板的制備
1. 以碳酸鹽緩沖液將抗體稀釋成適當濃度(參考:5ug/ml),加入酶標板(50ul/孔),以膠帶封口,于4℃過液。
2. 棄抗體液,以雙蒸水沖洗3次,自然干燥后以膠帶封口。此為由已知抗體包被的酶標板,備用。
(二)底物濃度的摸索在底物緩沖液中加入不同量的底物(參考:5mg/10ml),加入酶標板中(50ul/孔),以膠帶封口,37℃避光保存2h,在沒有明顯變色的條件下選擇盡可能大的底物濃度。
(三)酶標抗原濃度的摸索選擇明確為陰性的標本,加至已包被抗體的酶標板中(50ul/ 孔);用稀釋液稀釋酶標抗原至適當倍數(參考:40~4000倍),同時加入酶標板中(50ul/ 孔),混合后封口后于37℃作用30min。大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒以洗液連續沖洗5次,然后于吸水紙上拍干,加入已摸索好的底物封口后于37℃作用30min,在保持有明顯變色的條件下選擇盡可能小的酶標抗原濃度。
二、正式試驗
1. 以稀釋液將待檢標本做適當稀釋(預試中確定)加入包被有已知抗原的酶標板中(50ul/孔),加封口膠帶于37℃作用30min。
2. 棄反應液,以沖洗液連續洗板5次并于吸水紙上拍干。
3. 加入酶標抗體(濃度在預試中確定)。加封口膠帶后于37℃作用30min。
4. 重復第2步。
5. 加底物(濃度在預試中確定),加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60 min,其間不時觀察,顯色滿意后加終止液50ul/孔。
6. 于酶標儀測定OD值,OPD用492nm測定,TMB用450nm測定。窗體頂端
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒結果演示
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒結果判斷定性測定
定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結果,即用滴度來表示反應的強度,其實質仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行試驗,呈陽性反應的zui高稀釋度即為滴度。根據滴度的高低,可以判斷標本反應性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。
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