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ELISA試劑盒操作程序

時間:2017-10-17閱讀:763
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ELISA試劑盒操作程序

a. 測定:以空白孔調零,在450nm波長下丈量各孔的吸光度值(OD值)。測定應在加停止液后15分鐘以內進行。
b. 依據elisa試劑盒免費代測規范品的濃度及對應的OD值核算出規范曲線的直線回歸方程,再依據樣品的OD值在回歸方程上核算出對應的樣品濃度。也能夠運用各種應用軟件來核算。應記住因為樣品稀釋了的,其實踐濃度應該乘以總稀釋倍數。
c. 別離設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其他各步操作相同)、規范品孔、待測樣品孔。在酶標包被板上規范品孔中參加規范品50μl;在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終究稀釋度為5倍)。每孔參加酶標試劑50μl,空白孔在外。悄悄晃動混勻,37℃溫育60分鐘。
d. 棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復5次,拍干。
e. 每孔先參加顯色劑A50μl,再參加顯色劑B50μl,悄悄震動混勻,37℃避光顯色15分鐘.
f. 取出酶標板,每孔加停止液50μl,停止反響(此時藍色立轉黃色)。

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