技術解析：ELISA試劑盒的顯色弱問題

顯色一定要控制時間，根據(jù)試劑盒說明操作即可。一般來說，顯色時間過短，結果偏低；顯色時間過長，空白增高或者非特異性顯色增加。

ELISA顯色弱的可能原因

對應的解決方法

超過有效期的產品可能會產生很弱的信號

檢查產品的有效期

加入試劑的體積和時間有誤

確定所使用的每一個試劑的體積正確的和加入的時間是適當?shù)?/p>

試劑、樣品用前未能平衡

用前試劑、樣品置室溫平衡10分鐘左右

縮短孵育時間能使實驗的信號變弱

檢查孵育的時間

在溫度變化的環(huán)境內孵育酶標板

確定孵育的溫度，應避免溫度的變化

使用了被污染的試劑

檢查試劑是否被污染

標準品/標本制備方法不規(guī)范

檢查標準品/標本的制備，標準品應按說明書進行復溶和稀釋。低溫貯存的標本避免反復凍融，嚴禁使用溶血標本。樣品用NaN3防腐,抑制了酶的反應

顯色底物制備不規(guī)范

檢查底物的制備，如體積是否正確，混合是否恰當充分

檢測時間不當

是否在規(guī)定的時間內檢測

儀器設定不正確，濾光片不匹配

儀器是否設定正確，濾光片的使用等

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