ELISA試劑盒怎樣操作咱們“實驗室見”

怎么挑選ELISA試劑盒？
*步、清晰檢查何種蛋白 。
第二步、清晰編碼該蛋白的基因與其它哪些物種同源性 。
第三步、尋找檢查這些物種蛋白的試劑盒。
第四步、咨詢商家ELISA是試劑盒運用的抗體類型：多抗仍是單抗？ 單抗是針對啥抗原決議簇的？
第五步、 做出自個的判別該買哪個試劑盒。

ELISA試劑盒試驗操作過程
1．運用前，將一切試劑充沛混勻。不要使液體發生很多的泡沫，防止加樣時參加很多的氣泡，發生加樣上的差錯。
2．依據待測樣品數量加上規范品的數量決議所需的板條數。每個規范品和空白孔建議做復孔。每個樣品依據自個的數量來定，能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3．參加稀釋好后的規范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素符號的抗體。蓋上膜板，悄悄振動混勻，37℃溫育1小時。
4．甩去孔內液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數添加一次。
5．每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻，37℃溫育30分鐘。
6．甩去孔內液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數添加一次。
7．每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8．取出酶標板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應當即測定成果。
9．在450nm波利益測定各孔的OD值。

ELISA試劑盒操作時應當留意哪些？
1．試劑應按標簽說明書儲存，運用前康復到室溫。稀稀往后的規范品應丟掉，不行保留。
2．試驗中不必的板條應當即放回包裝袋中，密封保留，防止蛻變。
3．不必的其它試劑應包裝好或蓋好。不一樣批號的試劑不要混用。保質前運用。
4．運用一次性的吸頭防止穿插污染，汲取停止液和底物A、B液時，防止運用帶金屬有些的加樣器。
5．運用干凈的塑料容器裝備洗刷液。運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6．洗刷酶標板時應充沛拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反響孔中吸水。
7．底物A應蒸發，防止長期翻開蓋子。底物B對光敏感，防止長期露出于光下。防止用手觸摸，有毒。試驗完成后應當即讀取OD值。
8．參加試劑的次序應共同，以確保一切反響板孔溫育的時刻一樣。
9．依照說明書中標明的時刻、加液的量及次序進行溫育操作。