PeproTech重組細胞因子常見問題解答
PeproTech公司的重組細胞因子產品經過了十分嚴格的生產、純化及質檢過程,保證其在投放市場之前,達到如下要求:
1. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。
2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。
3. 生物活性:進行相應的體外(in vitro)或體內(in vivo)活性檢測。
4. 蛋白含量:通過紫外光譜分析,SDS-PAGE電泳檢測;必要時應用HPLC定量標準蛋白溶液。
5. 內毒素:kinetic LAL法檢測內毒素。
6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經過濾除菌處理。
產品隨附的說明書上載有產品的各項相關信息。請仔細閱讀這些信息,了解其配制和貯存提示。如果在閱讀說明書后仍需更多信息,請查看以下常見問題解答,或致電我們的技術服務部門。
重組細胞因子的凍干狀態
與市場上已有的其他蛋白產品不同,PeproTech細胞因子不含carrier protein或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等),而是以低鹽的形式做凍干處理,因此微量的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內,形成很薄或不可見的蛋白層。PeproTech的質控過程確保每管裝有非常準確量的蛋白產品。所以我們建議在收到試劑后,務必于開蓋前先離心20-30秒,使可能附于管蓋或管壁的蛋白成分聚集于管低(此時能否見到白色沉淀均屬正常現象)。
重組細胞因子活性單位(units)的換算
各公司在開發出重組細胞因子并檢測其活性后,通常會以ED50(半數有效濃度)或units(活性單位)來標識其細胞因子的生物活性。因此1mg細胞因子中所含的活性單位(units)可以理解為將1mg/ml細胞因子原液稀釋成ED50的稀釋倍數,以下是二者的換算公式:
重組細胞因子的穩定性
除非產品說明書上另有特別說明,否則所有PeproTech蛋白產品都為凍干粉形式,在室溫下也能保持很好的穩定性。但是,我們推薦凍干產品保存于-20℃。大多數凍干產品經溶解和稀釋后,可短時間保存于4℃;若要進行較長時間保存,我們建議稀釋到工作液濃度并加入一定的carrier protein(如0.1% BSA),然后分裝保存于-20℃。請注意每一次凍融過程都會造成蛋白的部分變性,應避免反復凍融。
重組細胞因子的交叉活性
除了少數例外,大多數人類細胞因子對小鼠細胞都有活性。許多小鼠細胞因子對人類細胞也有活力表現,但是與相應的人類細胞因子相比比活力較低。一些人類的細胞因子如IL-7在小鼠細胞中甚至表現出比相應的小鼠細胞因子更高的比活力。而干擾素、GM-CSF、IL-3 和IL-4 是物種特異性的,對于非人類細胞幾乎沒有活性。相反,成纖維細胞生長因子 (FGFs) 和神經營養因子 (neurotrophins) 是高度保守的,在其它的動物物種細胞中也能表現很好的活性。
ECV304(人臍靜脈內皮細胞株) ATCC 株
PC-12分化(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤) ATCC 株
PA317(鼠胚胎成纖維細胞) ATCC 株
SP2/0(骨髓瘤細胞) ATCC 株
CHO(中國倉鼠卵巢細胞) ATCC 株
COS-7(SV40轉化的非洲綠猴腎細胞) ATCC 株
VERO(非洲綠猴腎細胞) ATCC 株
Ana-1(鼠巨噬細胞) ATCC 株
J-1111(白血病單核細胞) ATCC 株
J774A1(單核細胞巨噬細胞) ATCC 株
SPA-A1(肺腺癌細胞) ATCC 株
A673(橫紋肌瘤細胞) ATCC 株
L-02(正常肝細胞) ATCC 株
7721(7721肝癌細胞) ATCC 株
SK-N-SH(神經母細胞瘤) ATCC 株
HL-60(白血病原髓細胞) ATCC 株
ScaBER(膀胱鱗癌細胞) ATCC 株
WISH(羊膜細胞) ATCC 株
H08910(卵巢癌細胞) ATCC 株
Bcap-37(乳腺癌細胞) ATCC 株
Hela(宮頸癌細胞) ATCC 株
PC-3(人前列腺癌細胞) ATCC 株
SGC7901(胃腺癌細胞) ATCC 株
786-0(腎透明細胞腺癌) ATCC 株
6T-CEM(T細胞白血病) ATCC 株
Jecket(淋巴瘤細胞) ATCC 株
JAR(胚絨毛癌細胞) ATCC 株
PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤) ATCC 株
WI-38(人二倍體胚肺細胞) ATCC 株
THP-1(人單核細胞) ATCC 株
T-24(膀胱變移細胞癌) ATCC 株
A375(人類惡性黑色素瘤) ATCC 株
CHRF(人巨核細胞白血病) ATCC 株
K562(慢性髓原白血病) ATCC 株
RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) ATCC 株
CNE(鼻咽癌細胞) ATCC 株
RT4(膀胱癌細胞) ATCC 株
J82(膀胱癌細胞) ATCC 株
SHG44(膠質瘤細胞) ATCC 株
LoVo(人結腸癌細胞) ATCC 株
V79(中國倉鼠肺細胞) ATCC 株
U937(組織細胞淋巴瘤) ATCC 株
PT-67(病毒轉染小鼠細胞) ATCC 株
HEL(紅白血病細胞) ATCC 株
293(轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞) ATCC 株
C6(腦膠質瘤細胞) ATCC 株
SHZ-88(大鼠乳腺癌細胞) ATCC 株
CBRH-7919(大鼠肝癌細胞) ATCC 株
NCL-H460(非小細胞肺癌) ATCC 株
F9(畸胎瘤細胞) ATCC 株
5637(人膀胱癌細胞) ATCC 株
A549(人肺腺癌細胞) ATCC 株
MCF-7(人乳腺癌細胞) ATCC 株
B16(小鼠黑色素瘤細胞) ATCC 株
HCC1428(人乳腺癌細胞) ATCC 株
A-704(人腎癌細胞) ATCC 株
NCI-H1755 [H1755](人肺癌細胞) ATCC 株
SK-HEP-1(人肝癌細胞) ATCC 株
NCI-H838 [H838](人肺癌細胞) ATCC 株
SK-OV-3 [SKOV-3](人卵巢癌細胞) ATCC 株
HPAC(人胰腺癌細胞) ATCC 株
PC-3(人前列腺癌細胞) ATCC 株
SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型膠質瘤細胞) ATCC 株
EB-3 [EB3](人淋巴樣Burkitt淋巴瘤細胞) ATCC 株
HT-3(人子宮頸癌細胞) ATCC 株
TT(人骨髓樣甲狀腺癌細胞) ATCC 株
ES-2(人卵巢透明細胞癌細胞) ATCC 株
LoVo(人結腸癌細胞) ATCC 株
HT-29(人結腸癌細胞) ATCC 株
TE 115.T(人軟組織纖維瘤細胞) ATCC 株
Cates-1B(人睪丸淋巴胚胎性癌細胞) ATCC 株
SNU-398(人肝癌細胞) ATCC 株
Hep 3B2.1-7 [Hep 3B; Hep-3B; Hep3B](人肝癌細胞) ATCC 株
SNU-182(人肝癌細胞) ATCC 株
PLC/PRF/5(人肝癌細胞) ATCC 株
WERI-Rb-1(人視網膜母細胞瘤) ATCC 株
PA-1(人卵巢畸胎瘤細胞) ATCC 株
Hs 578T(人乳腺成纖維細胞) ATCC 株
Hs 578Bst(人乳腺成纖維細胞) ATCC 株
TE 354.T(人皮膚基底細胞癌) ATCC 株
TE 353.Sk(人正常皮膚細胞) ATCC 株
SW480 [SW-480](人結腸癌細胞) ATCC 株
SW620 [SW-620](人結腸腺癌細胞) ATCC 株
NCI-H1299(人肺癌細胞) ATCC 株
PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤) ATCC 株
COS-7(非洲青猴腎細胞) ATCC 株
TOV-112D(人上皮性卵巢癌細胞) ATCC 株
MRC-5(人正常胚肺成纖維細胞) ATCC 株
NCI-H1563 [H1563](人胚肺細胞) ATCC 株
NCI-H2170 [H2170](人肺鱗狀細胞癌) ATCC 株
Hs888Lu(人肺成纖維細胞) ATCC 株
SW 1271 [SW-1271; SW1271](人肺腺癌細胞) ATCC 株
Hep G2(人肝癌細胞) ATCC 株
SJCRH30 [RC13; RMS 13; SJRH30](人骨髓橫紋肌肉癌細胞) ATCC 株
C2C12(人肌肉成纖維細胞瘤) ATCC 株
G-7(小鼠骨骼肌肌肉母瘤細胞) ATCC 株
Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母細胞) ATCC 株
BLO-11(小鼠骨骼成纖維細胞) ATCC 株
NOR-10(小鼠骨骼肌成纖維細胞) ATCC 株
NCI-H596 [H596](人肺癌細胞) ATCC 株
NCI-H520 [H520](人肺癌細胞) ATCC 株
NCI-H1703 [H1703](人肺癌細胞) ATCC 株
NCI-H226 [H226](人肺癌細胞) ATCC 株
SK-MES-1(人肺癌細胞) ATCC 株
NCI-H1869 [H1869](人肺癌細胞) ATCC 株
SW 900 [SW-900; SW900](人肺癌細胞) ATCC 株
7F2(小鼠雜交瘤細胞) ATCC 株
3T3-L1(小鼠脂肪細胞) ATCC 株
THLE-3(人肝上皮細胞) ATCC 株
PT67(小鼠逆轉錄病毒包裝細胞) ATCC 株
hFOB 1.19(人SV40轉染成骨細胞) ATCC 株
HIT-T15(倉鼠beta胰島細胞) ATCC 株
Beta-TC-6(小鼠胰腺癌beta細胞) ATCC 株
Ca Ski(人小腸頸部表皮樣癌細胞) ATCC 株
GC-2spd(ts)(小鼠精母細胞) ATCC 株
NCL-H548(人胰腺癌細胞) ATCC 株
Hs 683(人腦視神經膠質瘤細胞) ATCC 株
Hs 1.Tes(正常人睪丸細胞) ATCC 株
Hs 181.Tes(正常人睪丸細胞) ATCC 株
Y567 [VTT C-79094] ATCC 株
[X464-20C] ATCC 株
NCYC 234 [IPAZSC 148] ATCC 株
Y-99 ATCC 株
STJ.EPI.H7 ATCC 株
[CIP 104786] ATCC 株
[CIP 104328; IAM 13570; ICMP 5794; NCPPB 2991] ATCC 株
ICPB TR7 [C-1; ICMP 8639; NCPPB 2626] ATCC 株
R1000 ATCC 株
A4 ATCC 株
MSU-1 ATCC 株
MSU-2 ATCC 株
NRRL 2543 [LSHTM BB325] ATCC 株
R3 ATCC 株
M-37 ATCC 株
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