人舌癌細胞操作前打開紫外燈30-60分鐘，這個大家都知道。不過你別忘了還要在操作前至少10分鐘打開抽濾裝置來保證效果，但紫外消毒期間建議不要進去一次特意打開抽濾裝置，可以與紫外燈一起打開，人舌癌細胞此時不需要抽濾開的過大就可以。（所謂的抽濾裝置就是就是那個風機，就是吹風超凈工作臺，不是過濾培養液的）!

細胞傳代培養（消化法）具體操作：

一：傳代前準備；

1.預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。

2.用75％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。

3.正確擺放使用的器械：保證足夠的*作空間，不僅便于*作而且可減少污染。

4.點燃酒精燈：注意火焰不能太小。

5.準備好將要使用的消毒后的空培養瓶，放入微波爐內高火，8分鐘再次消毒。

6.取出預熱好的培養用液：人舌癌細胞取出已經預熱好的培養用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。

7.從培養箱內取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞。

8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出舊培養液，用PBS清洗（沖洗），加入適量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以蓋住細胞，*消化溫度是37℃。

2. 人舌癌細胞 顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度。

3.吸棄消化液加入培養液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養液。

三：吹打分散細胞；

1.吹打制懸：用滴管將已經消化細胞吹打成細胞懸液。

2.吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入10ml離心管中。

3.平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以1000轉/分鐘離心6-8分鐘。

4.棄上清液，加入新培養液：棄去上清液，加入2ml培養液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。

四：分裝稀釋細胞；

1.分裝：將細胞懸液吸出分裝至2-3個培養瓶中，加入適量培養基旋緊瓶蓋。

2.顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于5×105/ml。zui后要做好標記。

五：繼續培養；

用酒精棉球擦拭培養瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO2培養箱中繼續培養。人舌癌細胞傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。當生長細胞鋪展面積占培養瓶底面積25％時為一個＋，占50％為＋＋，占75％時為＋＋＋。  

XY0001    組織細胞淋巴瘤細胞,U-937細胞

XY0002    總T淋巴細胞,OKT3細胞

XY0003    紫色直絲鏈霉菌

XY0004    紫紅曲霉

XY0005    子宮內膜腺癌細胞,HEC-1-B細胞

XY0006    子宮內膜癌 Ishikawa細胞

XY0007    子宮鱗癌細胞（高分化）HCC 94 [HCC941122]細胞

XY0008    子宮頸癌細胞,SiHa細胞

XY0009    轉移胰腺腺癌細胞,AsPC-1細胞

XY0010    轉血小板基因倉鼠卵巢細胞,CHO-pt細胞

XY0011    轉入Tet-off調控，含EGFP基因的CHO細胞,CHO-AA8細胞

XY0012    轉染了tk基因的SW038-C2細胞,SW038-C2-tk細胞

XY0013    轉染了microRNA-mock基因的陰性對照細胞,Hela-mock細胞

XY0014    轉基因細胞,3T3/Fas/com細胞

XY0015    轉基因鼻咽癌細胞系 CNE1-lmp\l細胞

XY0016    轉化的豚鼠胎體細胞,104C1細胞

XY0017    轉S9基因倉鼠卵巢細胞,ZA6細胞

XY0018    轉S9基因倉鼠卵巢細胞,ZA1細胞

XY0019    轉PYTL基因小鼠睪丸支持細胞,15P-1細胞

XY0020    轉HLA-2基因B細胞,T2細胞

XY0021    磚紅鏈霉菌

XY0022    豬腎細胞系 PK15細胞

XY0023    豬腎細胞系 PK13細胞

XY0024    豬腎細胞系 IBRS-2細胞

XY0025    豬腎細胞,PK-15細胞,

XY0026    豬腎細胞,LLC-PK1細胞

XY0027    豬腎上皮細胞,PK15-EGFP-puro細胞

XY0028    豬腎上皮細胞,PK（15）細胞

XY0029    豬腎近曲小管上皮細胞,LLC-PK1細胞

XY0030    豬髖動脈內皮細胞,PIEC細胞,

XY0031    豬霍亂沙門氏菌豬霍亂亞種

XY0032    豬骨髓間質干細胞,Pig MSC細胞

XY0033    豬睪丸細胞系 ST細胞

XY0034    豬肺泡巨噬細胞,3D4/21細胞

XY0035    豬鼻甲黏膜成纖維細胞,PT-K75細胞

XY0036    皺褶青霉

XY0037    中華根霉

XY0038    中國倉鼠體細胞,R 1610(細胞