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上海必泰生物科技有限公司
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Millipore ZipTip微量層析柱你了解多少?

時間:2020/12/28閱讀:7214
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Millipore ZipTip微量層析柱---為MALDI-ToF MS濃縮和純化樣品

概述

ZipTip的優點

  • 一步脫鹽、濃縮和純化
  • 分級分離復雜樣品,以獲得更有意義的數據
  • 適合肽、核酸和其他樣品的理想工具
  • 無滯留體積,z大化回收
  • 省卻了耗時的色譜分析

ZipTip是一種10 µL微量層析柱,配有0.6或0.2 µL色譜培養基柱床,固定于其末端,無滯留體積。是為了敏感的下游分析進行樣品濃縮和純化的理想工具。

下面是可以用ZipTip樣品制備加以改善的一些分析舉例:

  • 質譜
  • HPLC(高性能液相光譜)
  • 毛細管電泳
  • 原子吸收光譜

ZipTip微量層析柱簡單易用。

  • 將微量層析柱裝到單通道或多通道移液器、標準22口徑鈍端HPLC針、或兼容的自動移液/樣品制備站上。
  • 吸取和分配培養基數次以進行樣品結合。
  • 用類似方法,吸取和分配適當的清洗溶液,以去除污染物。
  • 將濃縮、純化后的樣品洗提到1–4 µL相容溶劑中,然后直接移液到質譜分析、小杯或其他分析步驟。

對于要求更小的洗提體積的應用(例如<1 µL),我們還提供含有0.2 µL培養基的微量柱床。

ZipTip微量層析柱為濃縮和純化飛克摩爾至皮摩爾的肽、蛋白和寡核苷酸提供了再現性和回收率z越的方法,使分析數據更好。要想進一步簡化分析,您還可以通過分步洗提來分級分離復雜的肽混合物。

性能

 

ziptip

有3種不同的ZipTip樹脂可供選擇:

樹脂相容分析物
C18樹脂(0.6 µL或0.2 µL柱床容積)寡核苷酸或小蛋白(<50 kDa)/肽水溶液
C4樹脂蛋白或肽(3 kDa – 100 kDa)水溶液
強陽離子交換樹脂(SCX)含有有機溶劑或除垢劑的肽溶液

ZipTip®微量層析柱是一種10 µL層析柱,配有0.6或0.2 µL色譜培養基柱床,固定于其末端。其特別適合為敏感的分析(例如MALDI-ToF MS)濃縮和純化樣品。ZipTip®微量層析柱為濃縮和純化飛克摩爾至皮摩爾的肽、蛋白和寡核苷酸提供了再現性和回收率z越的方法,使分析數據更好。要想進一步簡化分析,您還可以通過分步洗提來分級分離復雜的肽混合物。

規格

材料
微量層析柱聚丙烯
C18 和µ-C18 樹脂硅珠,15 µm,200 Å孔徑
C4樹脂硅珠,15 µm,300 Å孔徑
SCX樹脂強陽離子交換樹脂,12 µm,300 Å孔徑
體積,µL
微量層析柱10 µL
樹脂柱床0.2或0.6
容量
ZipTipC18當分析物達到飽和時,通常為5 µg
ZipTipµ-C18當分析物達到飽和時,通常為2.0 µg
ZipTipC4當分析物達到飽和時,通常為3.3 µg
尺寸
Tip 長度31 mm
Tip 內徑 (頂)3.375 mm
Tip 外徑 (頂)5.8 mm
溫度4至70 °C
pH 范圍pH1.5 – pH13.5;當24小時接觸時,為pH2 – pH12

推薦的配套設備

手動移液:
ZipTip微量層析柱適配大多數10 µL單通道移液器。如要同時處理8個樣品,建議使用Biohit Proline® 多通道電子移液器。
自動移液:
ZipTip微量層析柱還可配用多種自動移液系統,包括:

  • 用于Biospectrometry™ 的ABI SymBiot® 樣品工作站(ABI貨號:GEN602987),配有適合ZipTip微量層析柱通用錐尖和適合ZipTip盒子的支架適配器
  • 基因組溶液ProMS™ 樣品制備站
  • Bruker Daltonics MAP™ II 和 II/8 MALDI AutoPrep系統,配有適合ZipTip盒子的支架適配器(密理博貨號:ST0B DAP TR)
  • Tecan GENESIS工作站
  • CyBio CyBi™-96孔自動移液器

 脫鹽步驟

(1)用50%ACN中性溶液活化Millipore C18 ZipTip. 吸排5~10次。
(2)用0.1% 甲酸溶液平衡C18 ZipTip。 吸排除5~ 10次。」
(3)用2 ul 0.1%甲酸溶解酶切產物,用C18 ZipTip 吸附肽段。吸排5~10次。
(4)用0.1%甲酸溶液洗鹽。吸排2~3次。
(5)吸取4ul含0.1% 甲酸的50%ACN溶液洗脫肽段供質譜分析。在空樣品管①中吸排5~10次。
(6)吸取4ul含0.1%甲酸的70%ACN溶液洗脫肽段供質譜分析。在空樣品管②中吸排5~10次。
(7)用70%ACN中性溶液吸排5~10次,洗凈ZipTip柱。

特別注意事項:樣品中不應該含有機溶劑

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