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細(xì)胞增殖的酸性磷酸酶檢驗(yàn)法操作步驟

閱讀：440發(fā)布時(shí)間：2014-9-10

細(xì)胞增殖的酸性磷酸酶檢驗(yàn)法操作步驟:

1、96孔細(xì)胞培養(yǎng) 板中培養(yǎng)細(xì)胞，去培養(yǎng)液。用0.01mol/L PBS洗滌1次(如為懸浮細(xì)胞則用離心洗滌)。

2、去洗滌液后加入磷酸酶底物100μl/孔。

3、37℃，孵育1～4h。

4、加入0.1mol/L氫氧化鈉10μl/孔。

5、在多孔酶標(biāo)儀 上405nm處測(cè)光吸收度，將細(xì)胞培養(yǎng)板其中不含細(xì)胞，同樣處理過(guò)的一孔作為空白對(duì)照，所測(cè)的每孔光吸收度可間接反應(yīng)每孔中的細(xì)胞數(shù)。如在同樣條件下作一細(xì)胞數(shù)的系列標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，以細(xì)胞數(shù)為X軸，光吸收度為Y軸，可作直線回歸，可推算出每孔中的細(xì)胞。


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