(PA IgGElisa試劑盒)人血小板相關抗體 IgG說明書 實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人血小板相關抗體IgG(PA IgG)水平。用純化
的人血小板相關抗體IgG(PA IgG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依
次加入血小板相關抗體IgG(PA IgG),再與HRP 標記的血小板相關抗體IgG(PA IgG)抗體結
合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶
的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血小板相
關抗體IgG(PA IgG)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲
線計算樣品中人血小板相關抗體IgG(PA IgG)含量。
(PA IgGElisa試劑盒)人血小板相關抗體 IgG說明書操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10 孔,在*、第二孔中分別加標
準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二
孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,
混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉,再各取50μl 分別加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各
取50μl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混
勻后從第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準
品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,
濃度分別為48μg/L,32μg/L ,16μg/L,8μg/L, 4μg/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣
品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混
勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
(PA IgGElisa試劑盒)人血小板相關抗體 IgG說明書
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