廣銳生物-國內高、優Elisa試劑盒供應商 牛腺病毒(ADV)酶聯免疫技術說明

本試劑盒用于測定牛血清，血漿及相關液體樣本中腺病毒(ADV)的表達。
實驗原理：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫法（ELISA）測定標本中牛腺病毒(ADV)。用純化的牛
腺病毒(ADV)抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中腺病毒(ADV)相結合，經洗滌除去
未結合的抗原和其他成分后再與HRP 標記的腺病毒(ADV)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗
體復合物，經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在
酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），與CUTOFF
值相比較，從而判定標本中牛腺病毒(ADV)的存在與否。

牛腺病毒(ADV)酶聯免疫技術說明

酶標包被板1×48 1×96 2-8℃保存
陰性對照0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
陽性對照0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存

牛腺病毒(ADV)酶聯免疫技術說明

樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20 分鐘，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上
清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心
20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次
離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清，保存過程
中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/
分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞
濃度達到100 萬/ml 左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20 分
2
鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備
用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器
將標本勻漿充分。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待
檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上
進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

牛腺病毒(ADV)酶聯免疫技術說明