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斜面培養基的制作方法
點擊次數：358 發布時間：2017-2-21
斜面培養基相對和并列的概念是：平面培養基、高層培養基。固體培養基倒在培養皿內，凝固成平面的稱為平板培養基，用于菌種分離及研究菌類的某些特性；分裝在試管內，直立凝固而制成的稱為高層培養基，這樣接入菌種后雖然發育的面小了一點，但培養基的厚度增大，營養豐富，時間長些也不容易干燥、開裂，常用于保存菌種。
1、配制溶液
向容器內加入所需水量的一部分，按照培養基的配方，稱取各種原料，依次加入使其溶解，zui后補足所需水分。對蛋白胨、肉膏等物質，需加熱溶解，加熱過程所蒸發的水分，應在全部原料溶解后加水補足。
配制固體培養基時，先將上述已配好的液體培養基煮沸，再將稱好的瓊脂加入，繼續加熱至*融化。并不斷攪拌，以免瓊脂糊底燒焦。
2、調節pH值
用pH試紙（或pH電位計、氫離子濃度比色計）測試培養基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH進行調節，直到調節到配方要求的pH值為止。
3、過濾
用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培養基過濾。用紗布過濾時，折疊成六層，用濾紙過濾時，可將濾紙折疊成瓦棱形，鋪在漏斗上過濾。
4、分裝
已過濾的培養基應進行分裝。如果要制作斜面培養基，須將培養基分裝于試管中。如果要制作平板培養基或液體、半固體培養基，則須將培養基分裝于錐形瓶內。
分裝時，一手捏松彈簧夾，使培養基流出，另一只手握住幾支試管或錐形瓶，依次接取培養基。分裝時，注意不要使培養基粘附管口或瓶口，以免浸濕棉塞引起雜菌污染。
裝入試管的培養基量，視試管和錐形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培養基時，每只15×150毫米的試管，約裝3～4毫升（1/4～1/3試管高度），如制作深層培養基，每只20×220毫米的試管約裝12～15毫升。每只錐形瓶裝入的培養基，一般以其容積的一半為宜。
5、加棉塞
分裝完畢后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣，避免污染。棉塞應采用普通新鮮、干燥的棉花制作，不要用脫脂棉，以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。制作棉塞時，要根據棉塞大小將棉花鋪展成適當厚度，揪取手掌心大小一塊，鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中，用右手食指插入棉花中部，同時左手食指與拇指稍稍緊握，就會形成1個長棒形的棉塞。棉塞作成后，應迅速塞入管口或瓶口中，棉塞應緊貼內壁不留縫隙，以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過松，塞好后，以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應在管內或瓶內，上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆札，準備滅菌。