小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA Kit

酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒
ELISA應(yīng)用的一些說明：克服非特異性吸附
在ELISA中，非特異性吸附是值得注意的問題，如果抗原或抗體純化不過關(guān)，產(chǎn)生非特異性吸附是實(shí)驗(yàn)操作中無法避免的。
但是，即使抗原抗體的純化達(dá)到一定水平，還是有可能產(chǎn)生非特異性吸附。例如塑料載體表面的吸附，為了避免非特異性顯色，需用含Tween20的PBS或生理鹽水作為洗脫液，吐溫 （Tween）就是指聚氧乙烯去水*脂肪酸酯，為非離子型的表面張力物質(zhì)，常作為助溶劑。根據(jù)它與聚合*所結(jié)合的脂肪酸種類不同而進(jìn)行吐溫編號，結(jié)合月桂酸的為吐溫20，結(jié)合棕櫚酸的為溫40，結(jié)合硬脂酸的為吐溫60，結(jié)合油酸的為吐溫80。在免疫酶技術(shù)中常用含吐溫20的PBS作洗滌劑或作稀釋樣品和酶標(biāo)抗體（抗原）之用，它的洗滌效果要比牛血清蛋白溶液（0.5%）好，具有減少非特異性吸附和增強(qiáng)抗原抗體結(jié)合的作用。吐溫20的使用量一般在0.06%-0.1%.有學(xué)者認(rèn)為，Tween20還有增強(qiáng)特異性反應(yīng)的作用。另外，檢測血清和酶標(biāo)記抗體用含0.5%-1%牛血清白蛋白（或0.1%白明膠）稀釋也能得到增強(qiáng)特異性吸附的作用。樣品首先用稀釋的健血清孵育，也有助于去除非特異性顯色。除此之外，反應(yīng)的時間和掌握反應(yīng)劑zui適濃度，也有助于克服非特異性吸附。
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