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人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒實驗原理: 用純化的MT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標本或標準品、*化的MT抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物(TMB)顯色。
人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒現貨供應,公司專業提供各種種屬、各種系列ELISA試劑盒酶聯免疫檢測試劑盒。凡購買我公司ELISA試劑盒,均可享受免費代檢測服務。
在人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒實驗中我們需要注意一些實驗誤差的問題,下面就是為實驗減少誤差的具體操作步驟:
1.實驗使用前,將所有試劑充分搖勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免在實驗加樣時加入大量的氣泡,實驗時在加樣上產生誤差。
2.根據待檢測樣品的數量加上標準品的數量決定所需要使用的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品需根據自己的數量來定,如在實驗中能使用復孔的則盡量做復孔。
3.將稀釋好后的標準品50ul加入反應孔、并加入待測樣品50ul在反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩使其均勻,在37℃的條件下溫育1小時。
4.以上實驗結束后即甩去孔內的液體,每孔均加滿洗滌液,振蕩30秒后,甩去孔內的洗滌液,用吸水紙拍干。重復操作3次即可。如果用洗板機洗滌,洗滌次數則需增加一次。
5.在每孔中加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩使其搖勻,在37℃的條件下溫育30分鐘。
6.將孔內的液體甩去,將每個孔中加滿洗滌液,振蕩30秒后,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7. 將每個孔中均加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩搖勻,在37℃的條件下溫育10分鐘。注意:避免光照。
8.在取出酶標板時,即迅速加入50ul終止液,加入終止液后立即測定結果。
9.zui后即在450nm波長處測定各孔的OD值。
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