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更新時間：2015-06-09 09:31:56瀏覽次數(shù)：270次
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人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理： 用純化的MT抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的MT抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物（TMB）顯色。
人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）ELISA試劑盒試驗(yàn)所需自備物品:
1. 酶標(biāo)儀（450nm波長濾光片）
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl
3. 37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
檢測前準(zhǔn)備工作:
1. 請?zhí)崆?/span>20分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋（1:25）。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正?，F(xiàn)象，可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
3. 標(biāo)準(zhǔn)品: 加入標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本稀釋液1.0ml至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中，靜置10分鐘，待其充分溶解后，輕輕混勻（濃度為5000 pg/ml）。然后根據(jù)需要進(jìn)行倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋）。建議配制成以下濃度： 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）5000pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
4. *化抗體工作液：實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量（以100μl/孔計(jì)），實(shí)際配制時應(yīng)多配制100-200μl。使用前15分鐘，以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體（1:100）成工作濃度。當(dāng)日使用。
5. 酶結(jié)合物工作液：實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量（以100μl/孔計(jì)），實(shí)際配制時應(yīng)多配制 100-200μl。使用前15分鐘，以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體（1:100）成工作濃度。當(dāng)日使用。
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