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上海滬宇生物科技有限公司
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閱讀:560發(fā)布時間:2018-6-4
zui近在做血清ELISA,重復了很多次,結果每次結果的背景值都很高,OD值達到0.6,很頭疼,嘗試過用封閉液稀釋抗體和血清,也嘗試過重重拍板拍干,結果均無濟于事!希望我司技術幫忙解決。根據我們的技術探討得出以下幾點:
ELISA試劑盒不正確的洗滌:洗滌不充分或漏洗都有會導致背景高。核對ELISA洗液的量并確保所有洗滌步驟都完成;確保eBioscience ELISA洗液被用并稀釋正確。讓洗液在孔里至少停留15-30s。
ELISA試劑盒底物被污染: 底物溶液自身是沒有顏色的,確保底物在用之前沒有被金屬離子或氧化試劑污染。
ELISA試劑盒稀釋液被污染:大部分ELISA稀釋液是蛋白基質,*次打開后就有可能已經被污染了,必須用無菌的移液管從瓶底移取使用。
ELISA試劑盒底物曝光:底物曝光可能會變藍,解決辦法就是使用前保存在棕色瓶里。
ELISA試劑盒偶聯(lián)物稀釋有誤:確保偶聯(lián)物稀釋按照說明書的要求,偶聯(lián)物濃度太高有可能導致高背景。
ELISA試劑盒孵育時間和溫度不對:孵育時間和溫度嚴格按照ELISA操作流程規(guī)定。
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