一、要求
安捷倫液相色譜儀是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此要求流動相具備以下特點(diǎn)：
1 純度：流動相必須用HPLC級的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45um或更細(xì)的膜過濾)。溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累，會影響色譜柱的使用壽命。
2 溶解度：樣品的溶解度要適宜如果溶解度，如果溶解度欠佳樣品會在柱頭沉淀，不但影響純化分離，還會縮短柱子的使用壽命。
3 粘度要低：高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì)，降低柱效，還會使柱壓降增加，使分離時間延長，選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動相。
4 樣品易于回收，應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。
二、安捷倫液相色譜儀的使用與維護(hù)
在日常分離分析工作中，色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要，色譜柱使用是否得當(dāng)，直接影響色譜柱的壽命，在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護(hù)色譜柱。
1 柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動，以免柱床產(chǎn)生空隙。
2 如果儀器用來做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根柱，這樣有助于延長柱子的壽命。
3 避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動，溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
4 應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/div>
5 如使用柱溫控制裝置時，應(yīng)注意在通人流動相后才能升溫。
6 一般說來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)，否則反沖會迅速降低柱效。
7 選擇使用適宜的流動相，以避免固定相被破壞，有時可以在進(jìn)樣器前面連接一個預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時，預(yù)柱為硅膠，可使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
8 避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi)，需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個保護(hù)柱，保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。
會員1.png)