14-3-3 蛋白抗體上海谷研生物科技有限公司產品名其它產品信息:Rabbit anti-mouse IgG/AP 堿性磷酸酶標記兔抗小鼠IgG0.1ml
Rabbit anti-pig IgG/AP 堿性磷酸酶標記兔抗豬IgG0.1ml
Rabbit anti-Guinea IgG/AP 堿性磷酸酶標記兔抗豚鼠IgG0.1ml
bovine-BSA/AP 堿性磷酸酶標記標記牛血清白蛋白0.1ml
Goat anti-human IgG/Biotin *化羊抗人IgG1ml
dog IgG/Cy3 熒光素Cy3標記狗IgG0.1ml
human IgG/Cy3 熒光素Cy3標記人IgG0.1ml
Monkey IgG/Cy3 熒光素Cy3標記猴IgG0.1ml
Rat IgM/Cy3 熒光素Cy3標記大鼠IgM0.1ml
14-3-3 蛋白抗體 Goat anti-mouse IgG/Biotin *化羊抗小鼠IgG0.1ml
Goat anti-Rabbit IgG/Biotin *化羊抗兔IgG(H+L)0.1ml
Goat anti-Chicken IgG/Biotin *化羊抗雞IgG0.1ml
Mouse anti-human IgG/Biotin *化小鼠抗人IgG0.1ml
HSA(Human serum albumin) /Cy3 熒光素Cy3標記*0.1ml
Mouse anti-goat IgG/FITC 熒光素標記小鼠抗羊IgG0.3ml
Mouse anti-rabbit IgG/FITC 熒光素標記小鼠抗兔IgG0.3ml
Rabbit anti-chicken IgM/Biotin *化兔抗雞IgM0.3ml
Rabbit anti-Goat IgG/Biotin *化兔抗羊IgG0.1ml
Rabbit anti-horse IgG/Biotin *化兔抗馬IgG0.1ml
Goat anti-mouse IgG/Cy5 ?熒光素Cy5標記羊抗小鼠IgG0.1ml
Goat anti-mouse IgG/Cy5.5 熒光素Cy5.5標記羊抗小鼠IgG0.1ml
Goat IgG/Cy5.5 熒光素Cy5.5標記羊IgG(細胞流式同型對照)0.1ml
Goat anti-human IgG/Cy7 ?熒光素Cy7標記羊抗人IgG0.1ml
MKP-2/DUSP4(Mitogen activated protein kinase phosphatase 2) 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗體0.2ml
Rabbit anti-human IgM/Biotin *化兔抗人IgM0.3ml
Rabbit anti-mouse IgG-Fc/Biotin *化兔抗小鼠IgG-Fc IgG0.3ml
Donkey human IgG/FITC 熒光素標記驢抗人IgG0.3ml
Donkey Guinea IgG/FITC 熒光素標記驢抗豚鼠IgG0.3ml
Chicken IgG/FITC 熒光素標記雞IgG0.3ml
Guinea IgG/FITC 熒光素標記豚鼠IgG0.3ml
human IgG/FITC 熒光素標記人IgG0.3ml
Mouse IgM/FITC 熒光素標記小鼠IgM0.3ml
Rat IgG/FITC 熒光素FITC標記大鼠IgG(細胞流式同型對照)0.3ml單克隆抗體(單抗)問世以來,在生物醫(yī)學研究及某些疾病的診斷及治療中發(fā)揮了重大作用,被譽為免疫學領域的一次革命。現已廣泛的應用于生物醫(yī)學研究和應用中。理論上,只要有抗原就可以制備成抗體,因此,單抗已應用于生物學(包括農業(yè))、醫(yī)學、工業(yè)制藥、化工及工業(yè)發(fā)酵等領域。作為檢驗醫(yī)學實驗室的診斷試 劑,單克隆抗體以其特異性強、純度高、均一性好等優(yōu)點,廣泛應用于酶聯免疫吸附試驗、放射免疫分析、免疫組化和流式細胞儀等技術。并且單克隆抗體的應用, 很大程度上促進了商品化試劑盒的發(fā)展。
免疫動物 免疫動物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產生致敏B淋巴細胞的 過程。 一般選用6-8周齡雌性Balb/c小鼠,按照預先制定的免疫方案進行免疫注射。 抗原通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進入外周免疫器官,刺激相應B淋巴細胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B淋巴細胞。
細胞融合 采用眼球摘除放血法處死小鼠,無菌操作取出脾臟,在平皿內擠壓研磨,制備脾細胞懸液。 將準備好的同系骨髓瘤細胞與小鼠脾細胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細胞可與骨髓瘤細胞發(fā)生融合,形成雜交瘤細胞。
選擇性培養(yǎng) 選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細胞,一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。在HAT培養(yǎng)基中,未融合的骨髓瘤細胞因缺乏次黃嘌呤-*-磷酸核糖轉移酶,不能利用補救途徑合成DNA而死亡。 未融合的淋巴細胞雖具有次黃嘌呤-*-磷酸核糖轉移酶,但其本身不能在體外*存活也逐漸死亡。 只有融合的雜交瘤細胞由于從脾細胞獲得了次黃嘌呤*磷酸核糖轉移酶,并具有骨髓瘤細胞能無限增殖的特性,因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖。
雜交瘤陽性克隆的篩選與克隆化 在HAT培養(yǎng)基中生長的雜交瘤細胞,只有少數是分泌預定特異性單克隆抗體的細胞,因此,必須進行篩選和克隆化。通常采用有限稀釋法進行雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng)。采用靈敏、快速、特異的免疫學方法,篩選出能產生所需單克隆抗體的陽性雜交瘤細胞,并進行克隆擴增。經過全面鑒定其所分泌單克隆抗體的免疫球蛋白類型、亞類、特異性、親和力、識別抗原的表位及其分子量后,及時進行凍存。
單克隆抗體的大量制備 單克隆抗體的大量制備重要采用動物體內誘生法和體外培養(yǎng)法。
(1)體內誘生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石臘或降植烷進行預處理。1-2周后,腹腔內接種雜交瘤細胞。雜交瘤細胞在小鼠腹腔內增殖,并產生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。
(2)體外培養(yǎng)法 將雜交瘤細胞置于培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,雜交瘤細胞產生并分泌單克隆抗體,收集培養(yǎng)上清液,離心去除細胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產生的抗體量有限。近年來,各種新型培養(yǎng)技術和裝置不斷出現,大大提高了抗體的生產量。
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