MDCK (NBL-2)(狗腎) 血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB) 血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶2(Tie-2)
RF/6A(猴脈絡膜-視網膜(內皮) ) 血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α) 基質金屬蛋白酶8/中性粒膠原酶(MMP-8)
MDBK (NBL-1)(牛腎) 神經營養(yǎng)因子4(NT-4) 基質金屬蛋白酶7(MMP-7)
LLC-MK2(恒河猴腎) 神經營養(yǎng)因子3(NT-3) 基質金屬蛋白酶3(MMP-3)
B95-8(EBV 轉化的絨猴白) 的神經生長因子(NGF) 基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)
Vero(非洲綠猴腎) 巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19) 基質金屬蛋白酶13(MMP-13)
COS-7(SV40 轉化的非洲綠猴腎) 巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚*千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學各領域的應用范圍日益擴大,
可概括四個方面:
1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
elisa試劑盒進口分裝
進口分裝:
檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的*性不是很好。
試劑盒的標準曲線zui高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標準曲線相關系數R≥0.99。
試劑盒重復性好,板內、板間變異系數均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。
檢測抗體及酶結合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作,保證實驗結果的重復性。
免疫測定技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結合反應,所以任何優(yōu)質的診斷試劑離不開優(yōu)質的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標記物如酶標結合物則通過各種化學合成方法制備。近年來,隨著分子生物學的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結合物等免疫測定試劑幾成為現實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現。
elisa試劑盒樣品收集,處理及保存方法
1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。