小鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒其他指標:TE-11(食管癌) 血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB) *硫轉移酶pi基因(GSTpi)
SK-BR-3(乳腺腺癌) CXC趨化因子配體16(CXCL16) *S轉移酶(GSTs)
SK-BR-3(乳腺腺癌) CXC趨化因子受體3(CXCR3) 泛素分解酶(DUB)
TE-10(食管癌) γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16) 分泌型磷脂酶A2(sPLA2)
ZR-75-30(乳腺癌) 基質衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12) 泛素連接酶(E3/UBPL)
TE-1(食管癌) 淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1) 肥大類*(MCT)
Bcap-37(乳腺癌) α干擾素(IFN-α) 多巴色素異構酶(DT)
Eca-109(食管癌) 可溶性CD86(B7-2/sCD86) 泛素結合酶(E2/UBCE)
小鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒ELISA的應用
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚*千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大,
可概括四個方面:
1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
試劑器材
試劑
(1) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):
Na2CO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至1000ml
(2) 洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸餾水至1000ml
(3) 稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
(4) 終止液(2M H2SO4):
蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
(5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml
0.1M檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
(6) TMB(四甲基聯苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml
底物緩沖液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
(7) ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物緩沖液(PH5.5) 1ml
3%H2O2 2μl
(8) 抗原、抗體和酶標記抗體。
(9) 正常人血清和陽性對照血清。
elisa試劑盒樣品收集,處理及保存方法
1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。