| 17-0020-01 | Sephadex G-10 medium（葡聚糖凝膠G-10） | Pharmacia | 25g |
| 葡聚糖凝膠G-10 Sephadex G-10 medium 葡聚糖凝膠使用說明 | |||
| 化學和物理性質 | |||
| 葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠，含有大量的羥基，很容易在水中和電解質溶 | |||
| 液中溶脹。G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯度，因此它們的溶脹度和分級分 | |||
| 離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影 | |||
| 響。 | |||
| 葡聚糖凝膠有不同的粒度。超細級的葡聚糖凝膠是用于需要*分辨率的柱 | |||
| 色譜和薄層色譜。粗級和中級的凝膠用于制備性色譜過程，可在較低的壓力下獲 | |||
| 得較高的流速。另外，粗級也可用于批量工藝。 | |||
| 化學穩定性 | |||
| 葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑（除非它被化學降解）。它在水、鹽溶液、有機 | |||
| 溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩定的，在強酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解。*接觸氧化劑將破壞凝膠，因而應避免使用。 | |||
| 物理穩定性 | |||
| 葡聚糖凝膠并不熔融，可以在濕態、中性 PH 進行滅菌或在高壓滅菌器 120 | |||
| ℃、 30 分鐘而不影響它的色譜性質。干態的凝膠加熱至120℃以上將開始焦糖化。 | |||
| 葡聚糖凝膠的機械強度取決于交聯度。 | |||
| 產品說明： | |||
| 產 品 名 稱 分 離 范 圍 應 用 | |||
| 葡聚糖凝膠 G-10 <700 緩沖液交換、脫鹽，分離小分子，去除小分子 | |||
| 葡聚糖凝膠 G-15 <1500 緩沖液交換、脫鹽，分離小分子，去除小分子 | |||
| 葡聚糖凝膠 G-25 1000-5000 工業上脫鹽及交換緩沖液 | |||
| 葡聚糖凝膠 G-50 1000-30000 多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定 | |||
| 葡聚糖凝膠 G-75 2000-70000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數測定 | |||
| 葡聚糖凝膠 G-100 2000-120000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數測定 | |||
| 葡聚糖凝膠 G-150 5000-300000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數測定 | |||
| 葡聚糖凝膠 G-200 5000-600000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數測定 | |||
| 使用方法： | |||
| 1. 乙醇浸泡： | |||
| 在室溫下，將干粉浸泡于 50-60%乙醇中至少 24 小時，并不斷攪拌以保證凝膠 | |||
| 溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干; | |||
| 2. 無鹽水浸泡： | |||
| 室溫下，在無鹽水中充分溶脹 24 小時，間隙攪拌，以保證凝膠的*溶脹， | |||
| 然后； | |||
| 3. 鹽酸浸泡： | |||
| 在常溫下再用 0.2N HCl 浸泡 12 小時，間隙攪拌，濾干，水洗只中性； | |||
| 4. 將溶脹好的凝膠脫氣后（真空抽濾或超聲波）根據裝柱要求一次性置入柱內， | |||
| 注意保持濕態裝柱，并避免柱內產生氣泡或斷層； | |||
| 5. 上樣前平衡層析柱至少 3-5 個柱體積直到記錄儀基線變得平穩為止（流出液的 | |||
| PH值等于上柱的 Buffer 的 PH值）； | |||
| 6. 凝膠過濾的上樣量一般為 5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在 1-2%的 | |||
| 床體積，視分離情況可以調整；脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關，柱高控制在 40-50cm 以下，過高的凝膠層會引起較大 | |||
| 的反壓，應當盡可能避免。難分離物質要有一定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比 | |||
| 為 5：1 即可； | |||
| 7. 洗脫方法： | |||
| 可以用無鹽水，也可以采用上柱時的緩沖液洗脫；在上柱 Buffer 中加入 NaCl | |||
| 等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化； | |||
| 8. 在位清洗（CIP） | |||
| 凝膠使用十次后作一次 CIP，目的是去除柱床內沉淀的及頑固殘留的蛋白。 | |||
| 方法是以 40cm/h 用 1M 氫氧化鈉反向洗四個柱體積，再以至少三個柱體積平衡 | |||
| 緩沖液再生。 | |||
| 備注: 其它規格葡聚糖凝膠處理方法類似。 | |||
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