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北京雅安達生物技術有限公司

鯉魚卵黃蛋白原ELISA試劑盒 實驗原理

時間:2013-6-28閱讀:326
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鯉魚卵黃蛋白原ELISA試劑盒 實驗原理

產品名稱:鯉魚卵黃蛋白原ELISA試劑盒
檢測范圍:
樣品形式:血清/血漿/細胞培養上清/其它生物液體(具體情況請咨詢)
保存與運輸:短期4℃/長期-20℃保存
應用范圍:科研檢測試劑
北京雅安達生物經營產品包括Elisa檢測試劑盒 -囊括小鼠、大鼠、人、犬、雞、猴子、牛 兔 豬 鴨 植物等種屬。全國:010 -57269780

標本的采集及保存
1. 組織勻漿: 將動物的組織標本先用PBS洗滌,去除多余血液,勻漿化后放在20mlPBS中于-20° C放置過夜,第二天,經過二次反復凍融破膜,將勻漿物5000x g離心5分鐘,取上清即可檢測。
2. 細胞培養物上清或其它生物標本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:以上標本置4℃保存應小于1周,-20℃或-80℃均應密封保存,-20℃不應超過1個月,-80℃不應超過2個月;標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測;高血脂的標本不需進行特殊處理,可直接檢測。

Elisa試劑盒質量保證是一個復雜的過程,許多重要的環節都影響到檢測的質量
一、方法學的影響
ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,結果重復性較差,質量較難控制。
二、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量*一致,即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。嚴格執行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的復雜過程,并且能夠保證結果的穩定性;對于效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復凍融造成試劑的失效。
三、樣本因素
標本干擾因素包括內源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、*等,后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。
四、操作因素對ELISA結果的影響
ELISA操作步驟復雜,操作不當將引起較大的誤差。以下敘述各個步驟中的影響因素。
1.加樣
2.溫育
3.洗滌
4.顯色
5.比色
五、灰區的設置
通常情況下,ELISA定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定結果報告的依據。
六、標本復查
ELISA手工檢測過程復雜,影響因素較多,即使室內質控在控,也可能因孔間差異而造成結果的差異,因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法,比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結果進行復查。
七、結果判斷和報告
常用下列幾種方法表示結果:
1.定性測定
2.半定量測定 結果一般以滴度表示。
3.定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定,繪制標準曲線,結果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線。。

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