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MS培養基的作用
植物組織培養中常用的一種培養基是MS培養基。
編輯本段MS培養基的配制步驟
這樣每次使用時,取其總量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀釋,制成培養液。現將制備培養基母液所需的各類物質的量列出,供配制時使用。 大量元素(母液Ⅰ) mg/L NH4NO3 33 000 KNO3 38 000 CaCl2·2H2O 8 800 MgSO4·7H2O 7 400 KH2PO4 3 400 微量元素(母液Ⅱ) KI 166 H3BO3 1 240 MnSO4·4H2O 4 460 ZnSO4·7H2O 1 720 Na2MoO4·2H2O 50 CuSO4·5H2O 5 CoCl2·6H2O 5 鐵鹽(母液Ⅲ) FeSO4·7H2O 5 560 Na2-EDTA·2H2O 7 460 有機成分(母液Ⅳ)ⅣA 肌醇 20 000 ⅣB* 100 鹽酸吡哆醇(*6) 100 鹽酸硫胺素(*1) 100 * 400 以上各種營養成分的用量,除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外,其余的均為200倍濃縮液。 上述幾種母液都要單獨配成1 L的貯備液。其中, 母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每種母液中的幾種成分稱量完畢后,分別用少量的蒸餾水*溶解,然后再將它們混溶,zui后定容到1 L。 母液Ⅲ的配制方法是:將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中,邊加熱邊不斷攪拌使它們溶解,然后將兩種溶液混合,并將pH調至5?5,zui后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。各種母液配完后,分別用玻璃瓶貯存,并且貼上標簽,注明母液號、配制倍數、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。 MS培養基中還需要加入:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6-芐基嘌呤(6-BA)等植物生長調節物質,并且分別配成母液(0?1 mg/mL)。其配制方法是:分別稱取這3種物質各10 mg,將2,4-D和NAA用少量(1 mL)無水乙醇預溶,將6-BA用少量(1 mL)的物質的量濃度為0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解過程需要水浴加熱,zui后分別定容至100 mL,即得質量濃度為0?1 mg/mL的母液。 配制培養液 用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的用量:母液Ⅰ為50 mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2,4?D 5 mL、NAA 1 mL,與各種母液一起放入燒杯中。
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