上海哈靈生物科技有限公司
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參考價 | ¥ 15 |
訂貨量 | 1 |
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- 所在地 上海市
更新時間:2016-03-01 09:48:12瀏覽次數(shù):143
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凡購買本公司小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒提供免費(fèi)代測服務(wù),您只需把標(biāo)本寄過來,我們?yōu)槟?jié)省時間,幫您出結(jié)果。原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供,實(shí)驗(yàn)時間一般一個周左右給您結(jié)果。我們有專業(yè)的技術(shù)人員為您提供全程技術(shù)指導(dǎo)。包括售前的標(biāo)本收集,使用過程中不清楚的地方,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,有任何疑問,我們都會即時與您溝通。(如果您需求咱們代處理樣本,咱們要收取必定的樣本處理費(fèi)用)真摯歡迎您,期待與您的合作!
【說 明 書】:隨貨發(fā)送,也可在線銷售索取
【儲存方式】:2-8℃ 6個月
【規(guī) 格】:48t/96t
【用 途】:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷.
【特 點(diǎn)】:靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好.
【庫存狀態(tài)】:現(xiàn)貨供應(yīng)
【檢測種屬】:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨、猴ELISA試劑盒等種屬。
【發(fā)貨方式】:快遞,全國包郵,針對上海客戶我們可以提供免費(fèi)送貨上門及取標(biāo)本。
96T規(guī)格可測85個樣,設(shè)10個標(biāo)準(zhǔn)孔1個空白對照。
48T規(guī)格可測37個樣,設(shè)10個標(biāo)準(zhǔn)孔1個空白對照。
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒的搜集:搜集標(biāo)本前有必要明白要檢查的成份是不是足夠安穩(wěn)。對搜集后當(dāng)天進(jìn)行檢查的標(biāo)本,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑貏e緣由需求周期搜集標(biāo)本,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保留。防止重復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保留48小時,-20℃可保留1個月。-70度可保留6個月。有些激素類標(biāo)本需增加抑肽酶。
ELISA試劑盒的樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200ng/L,800ng/L ,400ng/L,200ng/L,100ng/L)。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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