上海哈靈生物科技有限公司
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通用型線粒體DNA損傷超長延展定量PCR擴增分析試劑盒
2016-7-12 閱讀(447)
主要用途
我公司通用型線粒體DNA損傷超長延展定量PCR擴增分析試劑是一種旨在運用rTth聚合酶XL進行超長延展PCR擴增,產(chǎn)生8.9kb線粒體DNA目標片段,根據(jù)產(chǎn)物量值的差異,來定量分析線粒體DNA損傷程度的而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。廣泛應用于腫瘤、衰老、毒理作用、DNA修復等研究。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,無核酶污染,操作便捷,敏感,重復性強。
注意事項
- 本產(chǎn)品為20次操作
- 操作時,須戴手套
- 建議使用帶濾芯的槍頭,避免污染
- 在-20℃冰箱里儲存的產(chǎn)品避免反復凍融
- 建議樣品為純化的線粒體DNA
- 根據(jù)用戶PCR儀的性能,決定是否加入礦物油(Mineral Oil)
- 本產(chǎn)品適合各種熒光定量PCR儀
- 建議整個操作在4℃下進行
- 配制完成后,即刻進行擴增反應,以確保反應物的活性
- PCR擴增反應的zui初3個循環(huán)為定量基線;3至15個循環(huán)的熒光信號的10倍值為熒光閾值;熒光信號達到閾值所需的循環(huán)數(shù)為Ct值(參考圖像如下)
- Ct值作為端粒酶活性的計量單位
- 用戶可以使用293細胞(10,100,和1000細胞數(shù))作為陽性對照,以此建立標準曲線:橫座標(X軸)為細胞量對數(shù),縱座標(Y軸)為Ct值
- 建議選用正常淋巴細胞作為正常對照或校正對照,以此作為評價hTERT的參考指標;用戶可以選用任何其它正常細胞或組織,例如腫瘤組織旁的正常組織等
- 建議選用hTERT陽性表達的MCF7細胞作為陽性對照,以此構建標準曲線:縱坐標(Y軸)為Ct值,橫坐標(X軸)為已知細胞量對數(shù)值或拷貝數(shù)或RNA量等,其zui低有效用量作為樣品檢測量的標準
- 建議使用無模板作為陰性對照
- 內參液(Reagent E)為看家基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶基因(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase;GAPDH)作為比較分析時樣品測試用量校正統(tǒng)一的參考標準
- Ct值可以作為hTERT表達的計量單位,也可以根據(jù)標準曲線轉換為表達分子數(shù)進行計量
- 本公司提供系列線粒體DNA損傷檢測試劑產(chǎn)品
如:
通用型線粒體DNA損傷AP位點比色法定量分析試劑盒