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上海哈靈生物科技有限公司
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公司信息
乳酸脫氫酶（LDH）釋放法細胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒說明書
2016-6-13 閱讀(1599)
我公司 乳酸脫氫酶（LDH）釋放法細胞繁殖與毒性定量檢測試劑是一種旨在通過酶聯連續反應系統檢測由于細胞損傷導致的細胞內穩定的乳酸脫氫酶釋放到細胞外，使四唑鹽染料碘硝基氯化四氮唑（INT）還原為紅色甲臜（farmazan），即比色法定量測定酶活性，以評價活體細胞繁殖的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種藥物、化學、環境因子和營養因子處理的貼壁或懸浮生長中的動物或人體細胞。替代傳統的同位素[51 Cr]釋放檢測的選擇。
注意事項
- 本產品為100次（1個96孔板）操作
- 操作時須戴手套
- 整個操作須無菌操作
- 建議每個樣品安排3個孔，即重復3次，計算時取其平均值
- 檢測體系相應增加，試劑用量按比例相應增加：例如200微升檢測體系，試劑用量增加1倍
- 每孔中的培養液需100微升，避免使用周邊培養孔（常常液體蒸發而減少）
- 系統測試，可以加入10微升標準液（Reagent G）到50微升無細胞的細胞培養液里，然后加入反應液和顯色液即可
- 細胞裂解效果不佳，可以使用20微升裂解液（Reagent A）處理
- 孵育時，須避光
- 染色完成后，建議即刻檢測，zui遲不得超過1小時
- 細胞培養和處理時，避免使用草酸（OXALATE），草氨酸（OXAMATE）和EDTA，否則影響檢測的準確性
- 血清含有乳酸脫氫酶，建議使用濃度不要超過1％
- 細胞過度生長、密度過高、離心速度過大、培養箱內外溫差過大等因素會造成細胞自然釋放乳酸脫氫酶
- 酚紅會干擾檢測
- 樣品zui大酶活性對照孔或zui大OD吸光讀數與細胞裂解程度密切相關
- 如果用戶沒有孔板離心機，則移取上清液時格外小心
- 如果用戶沒有匹配的波長，可以使用波長470nm至570nm之間的任一波長替代
