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DMEM培養基是建立在平衡鹽溶液的基礎上
2013-12-23 閱讀(1157)
絕大多數DMEM培養基是建立在平衡鹽溶液基礎上
zui廣泛運用的培育基是Eearle`s MEM 的混合物,其間富含13種有必要氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包含非有必要氨基酸,維生素的規模亦很廣,別的慣例富含無機鹽和代謝添加劑。MEM/F12 這兩種培育基各取1/2,構成神經生物學zui通用的培育基。
Dulbecco`s改進培育基——DMEM,現運用于疾速成長的細胞,同MEM富含一樣的營養成分,但濃度高出2~4倍。挑選某種培育基,應細心曉得成分表,應曉得大多數景象下培育基都有缺少。例如,有些培育基在氨基酸中包富含谷氨酸,而這種培育基雖廣泛用于神經生物學范疇,但它對某些對谷氨酸靈敏的可能有細胞外毒性損害的神經元而言,則并非*挑選,特別是若是神經元成長在缺少膠質的環境中時。
DMEM培養基中,谷氨酸比其他氨基酸有更高的濃度
這是由于它具有不穩定性以及在許多細胞培育中它常用作碳源。關于神經元的培育常常在根底培育基中添加葡萄糖的含量到0.6%或許參加丙酮酸(若培育基中這兩種物質缺少時)。MEM與F12均要用5%的CO2來平衡,DMEM含更高濃度的NaCO3,要用10%的CO2來平衡,當然也能夠在較低CO2濃度下運用。
這些DMEM培育基的組成成分是樹立在對不一樣細胞系成長的研討之上的,但通常在原代培育中運用也能有對比令人滿意的成果。原則上,HEPES作為緩沖劑可用來替代碳酸氫鹽,以免除需求高濃度CO2培育環境的約束。實際操作中并非如此簡略。