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上海科鑒生物科技有限公司
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閱讀:659發布時間:2013-3-1
在使用微孔板檢測儀進行實驗的過程中,除了采用恰當的實驗方法,正確的操作流程和選擇有效的檢測試劑及試劑盒之外,另外一個實驗人員應該關注的問題就是如何選擇一塊合適的微孔板來進行實驗操作。微孔板是整個實驗反應及檢測的載體,孔板選擇的正確與否也關系到實驗結果的優劣。
本文向您大致介紹孔板的類型以及孔板的選擇方法,采用Corning 公司出品的微孔板為例。
微孔板的類型
依照顏色來分:
透明板:通體透明,用于進行細胞培養及觀測和比色分析白色板:不透明白色,阻擋光線在孔間干擾傳遞,并將信號反射至檢測探頭的探測范圍內,適用于化學發光試驗
白色透明底板:孔板底部為透明,其他部分為白色,是基于細胞學的化學發光檢測,在同一孔中可以同時進行比色和化學發光檢測分析
黑色板:不透明黑色,提高熒光檢測靈敏度,并允許在一孔內進行多重反應
黑色透明底板:孔板底部為透明,其他部分為黑色,是基于細胞學的熒光檢測,在同一孔中可以同時進行比色和熒光檢測分析
依照形狀來分:
平底板:用于大多數的實驗分析,適用于進行液體的分裝和細胞的培養
圓底板:適用于均相分析實驗,化合物存儲。易于清洗和樣品回收
V 底板:適用于化合物存儲,易于樣品回收,樣品殘留量少
易洗底板:提高免疫分析中孔板的清洗
依孔密度來分:
96 孔板75-250μL
384 孔板 20-100μL
1536 孔板 2-10μL
96 孔 半孔板 30-150μL,節省檢測試劑,適用于小反應體系實驗檢測
384 孔 低體積板 5-45μL,可節省檢測試劑,適用于小反應體系實驗檢測
微孔板的表面處里方法和材料
未處理板(NT):常規也指中等結合力板,適用于蛋白質分子在20KD 左右的結合實驗
高結合力板:適用于蛋白質分子在10KD 左右的結合分析實驗(ELISA, EIA,FIA)
無結合板(NBS):抑制疏水結合以及離子相互反應,可有效降低核酸和蛋白的結合,用于均相分析實驗,降低反應背景
UV 板:紫外線透過板,可進行zui低波長為220nm 的紫外吸收光檢測,用于進行核酸蛋白樣品的定量檢測。
孔板選擇的基本原則(均以Corning 公司96 孔板為例):
1 常規ELISA 的吸收光分析實驗,如果分析蛋白在20KD左右選擇中結合力透明板( 貨號# 3591),如果分析蛋白在10KD 左右則選擇高結合力透明板( 貨號# 3590)
2 常規均相非結合的吸收光分析實驗,則選擇無結合力的透明板( 貨號# 3641)
3 常規生物發光/ 化學發光分析實驗,選擇白色板( 貨號# 3912)
4 常規熒光ELISA 結合分析實驗,根據結合蛋白的大小選擇不同結合力的黑色板:如中度結合力板( 貨號# 3915) 和高結合力板( 貨號# 3925)
5 常規熒光均相非結合分析實驗,選擇無結合力的黑色板( 貨號# 3991)
6 培養細胞非裂解分析,并需要進行顯微鏡觀測及吸收光檢測,選擇底部透明的黑色板( 貨號# 3603)
7 樣品珍貴,或者希望減小反應體系節省試劑,則可選擇半面積板或低體積板。
8 特殊分析實驗,請參照試劑盒要求,進行孔板選擇系實驗檢測
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