免疫系統(tǒng)是相當(dāng)嘈雜的，B細(xì)胞與巨嗜細(xì)胞溝通，巨嗜細(xì)胞與T細(xì)胞交流，而T細(xì)胞則與免疫系統(tǒng)的所有成員通訊。細(xì)胞間交談的語言是細(xì)胞因子，包括趨化因子和生長因子在內(nèi)的各種細(xì)胞因子共同介導(dǎo)著機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞間通訊。目前已發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子種類繁多，在R&D公司的產(chǎn)品目錄中光“細(xì)胞因子”類別里的人類蛋白就有數(shù)百種，而eBioscience公司的目錄也列出了111種。
細(xì)胞分泌出的細(xì)胞因子，是能夠誘導(dǎo)細(xì)胞增殖、生長或分化等多種生理學(xué)反應(yīng)的蛋白小分子，其中包括白介素、干擾素等免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)子，成纖維細(xì)胞生長因子FGF、血管內(nèi)皮生長因子VEGF等生長因子，以及CCL2、CXCL8那樣的趨化因子（趨化因子誘導(dǎo)細(xì)胞遷移或趨化性）。對(duì)這些小分子蛋白進(jìn)行研究有多種工具，人們可以通過抗體檢測(cè)、ELISA、定量RT-PCR以及生物活性實(shí)驗(yàn)來檢測(cè)蛋白的豐度和活性。
在這些研究中往往需要用到純化的細(xì)胞因子，來刺激體外培養(yǎng)的細(xì)胞或者作為ELISA實(shí)驗(yàn)中的陽性對(duì)照。現(xiàn)在市面上有大量的細(xì)胞因子可供選擇，我們可以方便地在各大供應(yīng)商的上進(jìn)行搜索。那么如何才能從中選到的蛋白產(chǎn)品呢，以下四個(gè)方面不可忽視。
蛋白的來源
有些蛋白需要經(jīng)過翻譯后修飾才具有活性，哺乳動(dòng)物細(xì)胞可以提供這樣的修飾，但細(xì)菌細(xì)胞往往不能。因此，在選購這類蛋白時(shí)應(yīng)該特別留意產(chǎn)品說明書中的蛋白來源。例如，R&D公司的人TGF-beta 1蛋白是在中國倉鼠卵巢細(xì)胞中制備的，其人CCL2蛋白則是在大腸桿菌E. coli中制備的。而InvivoGen公司的重組人IL-4蛋白是在酵母中制備的。
蛋白的形式
重組生長因子通常有兩種形式：含牛血清白蛋白BSA或不含BSA（通常標(biāo)有“carrier-free”），選擇哪一種*取決于實(shí)驗(yàn)的需要。據(jù)eBioscience公司的資料介紹，BSA是一種穩(wěn)定劑，含BSA的蛋白可以作為ELISA實(shí)驗(yàn)中的理想標(biāo)準(zhǔn)品。而當(dāng)BSA可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)可以采用不含BSA的蛋白，carrier-free形式的蛋白尤其適用于活體實(shí)驗(yàn)。
生物活性和應(yīng)用
不論買什么，選擇質(zhì)量放心的產(chǎn)品總沒錯(cuò)。聲譽(yù)好的公司會(huì)對(duì)其蛋白產(chǎn)品進(jìn)行各種質(zhì)控，以確保蛋白的品質(zhì)和實(shí)驗(yàn)效果。他們往往會(huì)在說明書中提供蛋白純度、內(nèi)毒素含量、SDS-PAGE結(jié)果圖等多種數(shù)據(jù)。
在選擇蛋白產(chǎn)品時(shí)生物活性也是需要考慮到的因素。舉例來說，R&D公司用趨化因子CCL2處理轉(zhuǎn)染了人CCR2A的BaF3小鼠pro-B細(xì)胞和培養(yǎng)了兩日的人類單核細(xì)胞，以此衡量CCL2的趨化能力。而eBiosciences用TGF-beta 1來抑制IL-4誘導(dǎo)的HT-2細(xì)胞增殖，從而檢測(cè)TGF-beta 1的生物活性。
生物活性往往以u(píng)nits/ml或ED50（能引起50%zui大反應(yīng)強(qiáng)度的量）為單位，需要注意的是不同實(shí)驗(yàn)的ED50并不相同，供應(yīng)商們不可能把蛋白的每種應(yīng)用都一一測(cè)試全。我們需要在供應(yīng)商列出的應(yīng)用清單中尋找我們所需要的實(shí)驗(yàn)信息。
翻查文獻(xiàn)
如果你要進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)不幸并未在供應(yīng)商的應(yīng)用清單中列出，這說明該公司并沒有更多相關(guān)的內(nèi)部實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。不過，我們還可以查查產(chǎn)品說明書中的文獻(xiàn)列表，看看有沒有其他人已經(jīng)發(fā)表過類似的應(yīng)用，查文獻(xiàn)往往能省下大量的摸索時(shí)間。
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