有些實(shí)驗(yàn)室設(shè)備可以說(shuō)是無(wú)處不在，看看周圍，基本上每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都擁有移液槍和離心機(jī)，當(dāng)然還有酶標(biāo)儀。從化學(xué)、藥物研發(fā)到蛋白質(zhì)組學(xué)，酶標(biāo)儀是許多實(shí)驗(yàn)室*的中高通量檢測(cè)設(shè)備，可以進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附ELISA、NADH定量、蛋白相互作用分析和酒類檢測(cè)等等。
酶標(biāo)儀實(shí)際上是一種能夠放入微孔板并進(jìn)行讀取的微孔板檢測(cè)儀。市面上，酶標(biāo)儀有多種讀取模塊可選，包括zui經(jīng)典的吸收光、熒光和發(fā)光檢測(cè)三模塊，還有一些特殊的功能模塊，例如時(shí)間分辨熒光、熒光偏振、熒光共振能量轉(zhuǎn)移FRET、和濁度測(cè)定等等。濁度測(cè)定是通常用于溶解度和濁度分析的光散射檢測(cè)法。
zui常用的酶標(biāo)儀檢測(cè)模塊是吸收光、熒光和發(fā)光檢測(cè)。我們既可以選擇只具有某一種功能的單模塊酶標(biāo)儀，也可以選擇兼具不同功能的多模塊酶標(biāo)儀。市面上大多數(shù)廠商所提供的酶標(biāo)儀，類型多檢測(cè)范圍廣，不過(guò)也有一些公司專攻特殊領(lǐng)域，例如Biochrom公司和Bio-Rad Laboratories就專注于吸收光檢測(cè)。酶標(biāo)儀的應(yīng)用
下手任何商品之前我們都會(huì)首先考慮到它的應(yīng)用，在選擇酶標(biāo)儀時(shí)我們自然也會(huì)先想想要用它來(lái)做什么。如果我們只是做個(gè)ELISA在溶液中定量特定蛋白，那么可以選擇能在可見(jiàn)光范圍內(nèi)檢測(cè)吸光度的酶標(biāo)儀。對(duì)于Bradford法等蛋白定量實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，也同樣如此。不過(guò)，如果我們既需要定量核酸又要定量蛋白，那么就應(yīng)該選擇能夠讀取紫外光的酶標(biāo)儀。從根本上來(lái)說(shuō)，一個(gè)吸收光模式的酶標(biāo)儀，就是一個(gè)可以讀取微孔板的分光光度計(jì)。
如果我們需要構(gòu)建熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)，用其轉(zhuǎn)染細(xì)胞并定量其表達(dá)，那么就需要能夠進(jìn)行發(fā)光檢測(cè)的酶標(biāo)儀。若要用酶標(biāo)儀進(jìn)行熒光檢測(cè)，那么就得先確定是只需熒光強(qiáng)度檢測(cè)，還是需要時(shí)間分辨熒光等其他應(yīng)用。（時(shí)間分辨熒光技術(shù)中，背景信號(hào)在檢測(cè)前衰減，以此增強(qiáng)信噪比。）有些酶標(biāo)儀可以支持特定的第三方應(yīng)用，例如CisBio公司的均相時(shí)間分辨熒光HTRF實(shí)驗(yàn)，PerkinElmer公司的AlphaScreen® 和AlphaLISA® 實(shí)驗(yàn)等。
若是你對(duì)細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)感興趣，那么就應(yīng)當(dāng)選擇可以從微孔板底部讀數(shù)的酶標(biāo)儀，因?yàn)榧?xì)胞一般都長(zhǎng)在微孔底部，從底部讀取可以增加檢測(cè)的靈敏度和信噪比。目前，用成像技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞學(xué)研究已經(jīng)成為一股潮流，不過(guò)這樣的技術(shù)成本高檢測(cè)速度也比較慢，而酶標(biāo)儀快速讀取分析的能力使其更能滿足日益增長(zhǎng)的通量需求。
有時(shí)可能我們并不確定未來(lái)的應(yīng)用方向，或者很可能會(huì)用到多種檢測(cè)模式（例如需進(jìn)行多個(gè)項(xiàng)目的大型實(shí)驗(yàn)室），這時(shí)就可以考慮多模塊酶標(biāo)儀。相對(duì)于單模塊而言，多模塊酶標(biāo)儀雖然價(jià)格較高但其靈活性也更強(qiáng)。
配套微孔板
絕大多數(shù)酶標(biāo)儀可以兼容96孔和384孔微孔板，若要使用更高密度的微孔板，就需要相應(yīng)的模塊。專為高通量篩選設(shè)計(jì)的微孔板一般有1536孔，超高密度能達(dá)到3456孔，但支持這種超高密度微孔板的酶標(biāo)儀比較少。同樣，有些酶標(biāo)儀也不能支持低密度微孔板，例如細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中的6孔或24孔板。
速度和通量
如果實(shí)驗(yàn)室每天都要進(jìn)行大量的樣本分析，檢測(cè)幾十塊微孔板，那么就需要考慮到每塊板的檢測(cè)時(shí)間，如果時(shí)間過(guò)長(zhǎng)就可能對(duì)后檢測(cè)的樣品造成影響。有些酶標(biāo)儀只有一個(gè)通道，有些酶標(biāo)儀具有八個(gè)通道。即使是單通道酶標(biāo)儀，不同系統(tǒng)的讀取速率也不盡相同，讀取96孔板可能需要25s或15s。八通道酶標(biāo)儀讀取速度要快得多，單個(gè)波長(zhǎng)下讀取整塊96孔板僅需4s。
若是微孔板檢測(cè)的量很大，我們還可以選擇帶有plate stacker的酶標(biāo)儀，或者考慮將酶標(biāo)儀整合到自動(dòng)化工作流程中。假如待測(cè)樣品中的信號(hào)會(huì)很快衰退需盡快讀取，那么選擇整合有液體處理系統(tǒng)的酶標(biāo)儀，或者給酶標(biāo)儀配上自動(dòng)注射裝置。
給定檢測(cè)模塊可用的檢測(cè)器數(shù)量，也同樣會(huì)影響酶標(biāo)儀檢測(cè)的速度。配備多個(gè)檢測(cè)器可以同時(shí)讀取多個(gè)孔，也可以同時(shí)讀取一個(gè)孔中的多種信號(hào)。配備多個(gè)光電倍增管的熒光檢測(cè)系統(tǒng)能夠使檢測(cè)速度顯著提高，在某些情況下能將檢測(cè)時(shí)間減少一半。
光學(xué)系統(tǒng)
購(gòu)買酶標(biāo)儀時(shí)，選擇合適的光學(xué)系統(tǒng)很重要。絕大多數(shù)酶標(biāo)儀要么是濾光片型，要么是單色器型（包括光柵和棱鏡）。一般來(lái)說(shuō)，濾光片比單色器更靈敏，但一個(gè)濾光片只能檢測(cè)一個(gè)特定波長(zhǎng)，這限制了濾光片系統(tǒng)的靈活性。單色器系統(tǒng)一般通過(guò)光柵選擇特定波長(zhǎng)，其靈活性就比濾光片要大，不過(guò)其檢測(cè)速度稍慢。單色器系統(tǒng)能夠進(jìn)行光譜掃描，而濾光片系統(tǒng)就無(wú)法實(shí)現(xiàn)。
有些廠家將濾光片的靈敏性與單色器的波長(zhǎng)選擇能力結(jié)合起來(lái)，例如Molecular Devices公司為其SpectraMax Paradigm平臺(tái)推出的TUNE波長(zhǎng)可調(diào)節(jié)檢測(cè)卡盒（TUNE detection cartridge）。還有BioTek公司的Hybrid Technology系統(tǒng)，該系統(tǒng)將濾光片和單色器組合起來(lái)，想用濾光片時(shí)選濾光片，想用光柵時(shí)選光柵。此外，BMG LABTECH公司的分光光度計(jì)利用棱鏡分光并投射到CCD裝置上，能夠同時(shí)實(shí)現(xiàn)200到1000 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)的檢測(cè)。
升級(jí)能力
實(shí)際上真正把升級(jí)能力利用起來(lái)的用戶并不多，換句話說(shuō)大多數(shù)用戶從來(lái)不曾真去升級(jí)，不過(guò)它的確能使你的系統(tǒng)不那么容易過(guò)時(shí)，也能為日后拓展應(yīng)用省下一筆開(kāi)支。如果目前我們的資金無(wú)法一次配齊全套檢測(cè)模塊，那么可以先支出較少的入門費(fèi)用，等日后再逐步升級(jí)。
其他因素
根據(jù)實(shí)驗(yàn)的不同需要，我們?cè)谫?gòu)買酶標(biāo)儀之前，可能還需要考慮到溫度控制、氣體控制（為細(xì)胞實(shí)驗(yàn)控制氧氣/二氧化碳條件）、振搖、一體化液體處理系統(tǒng)（能在讀數(shù)前添加試劑）等等。此外，有時(shí)還要考慮到廠家所能提供的各項(xiàng)認(rèn)證，例如IQ、OQ和PQ；21 CFR 11；GLP和GMP等。
如果我們所要檢測(cè)的樣品量很小，就需要采用微量的檢測(cè)裝置，例如Tecan公司的NanoQuant Plate，Thermo公司的μDrop Plate，BioTek公司的Take3超微量檢測(cè)板等等，上述裝置可以同時(shí)對(duì)16個(gè)2μL樣品進(jìn)行DNA 或RNA定量。
軟件的數(shù)據(jù)分析和用戶界面也是需要考慮的因素。對(duì)此我們可以提出以下問(wèn)題：軟件是否直觀簡(jiǎn)便？是否支持多個(gè)使用者？是否簡(jiǎn)化了校準(zhǔn)等維護(hù)程序？是否需要軟件許可證？
zui后專家提醒我們，在選擇酶標(biāo)儀時(shí)，應(yīng)當(dāng)將其視為工作流程的一部分。酶標(biāo)儀的檢測(cè)很快，但還是需要一些人工操作的，尤其是對(duì)于96孔板或384孔板檢測(cè)。如果檢測(cè)量很大，就有必要購(gòu)入洗板機(jī)。一切的一切，都是為了提高檢測(cè)的信噪比，獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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