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卡邁舒(上海)生物科技有限公司
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三、抗原或抗體檢測的方法
由于各種檢測方法中所用的抗原性狀不同,出現結果的現象也不同。zui廣泛應用方法有下述幾種:
(一)沉淀反應
可溶性抗原與抗體結合,在兩者比例合適時,可形成較大的不溶性免疫復合物。在反應體系中出現不透明的沉淀物,這種抗原抗體反應稱為沉淀反應(precipitation neaction)。
1.環狀沉淀試驗 先將含抗體的未稀釋的免疫血清加到直徑小于 0.5cm的小試管底部。將稀釋的含有可溶性抗原的材料重疊于上,讓抗原與抗體在兩液體的界面相遇,形成白色免疫復合物沉淀環,故名為環狀沉淀試驗(ring precipitationtest),此法簡便易行,需用材料較多是其缺點。
2.單向免疫擴散試驗 單向免疫擴散試驗(singleimmunodiffusion)是在凝膠中進行的沉淀反應。將抗體混入加熱溶解的瓊脂中,傾注于玻片上,制成含有抗體的瓊脂板,在適當位置打孔,將抗原材料加入瓊脂板的小孔內,讓抗原從小孔向四周的瓊脂中擴散,與瓊脂中的抗體相遇形成免疫復合物。當復合物體積增加到一定程度時停止擴散,出現以小孔為中心的圓形沉淀圈,沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度成正相關。本方法簡便,易于觀察結果,可測定抗原的靈敏度(zui低濃度)約為10~20μg/ml,常用于定量測定人或動物血清IgG、IgM、IgA和C3等,其缺點是需1~2天才能看結果
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